La micropropagación de Calophyllum brasiliense Cambess. (Clusiaceae) es una forma de superar las dificultades para lograr una producción vegetal a gran escala, dada la naturaleza recalcitrante de las semillas, la fructificación irregular y la ausencia de propagación vegetativa natural de la especie. Los cultivos se establecieron utilizando segmentos nodales de 2 cm de longitud, obtenidos de plántulas de 1 a 2 años de edad, mantenidas en invernadero. Se utilizó cloruro de mercurio y Plant Preservative Mixture™ en la etapa de esterilización de la superficie, obteniéndose mejores resultados con la incorporación de Plant Preservative Mixture™ al medio de cultivo, en cualquier concentración. Se añadieron polivinilpirrolidona, carbón activado, cisteína, ácido ascórbico o ácido cítrico al medio de cultivo para evitar la oxidación. Después de 30 días de cultivo, la polivinilpirrolidona y el ácido ascórbico dieron mejores resultados, eliminando la oxidación en la mayoría de los explantos. Para la multiplicación de brotes, se utilizó bencilaminopurina en concentraciones de 4,4 y 8,8 µM en medio para plantas leñosas, lo que resultó en un promedio de 4,43 y 4,68 brotes por explante, respectivamente, después de 90 días. Se utilizaron ácido indol-3-butírico y ácido α-naftalen acético para inducir la formación de raíces, alcanzando una tasa máxima de enraizamiento del 24 % con 20 µM de ácido α-naftalen acético. Para la aclimatación, las plantas enraizadas se transfirieron al sustrato Plantmax® y se cultivaron en invernadero, alcanzando una tasa de supervivencia del 79 % a los 30 días y del 60 % al año.