Se compararon los métodos para la eliminación del plasma seminal (SP) y la selección de espermatozoides de pecarí con collar para la fertilización. Los experimentos evaluaron lo siguiente: (I) el impacto de la centrifugación para la eliminación de SP antes del swim-up para la selección de espermatozoides y (II) una comparación de diferentes densidades de gradiente de Percoll (PG 45-90% y PG 35-70%). Los espermatozoides no seleccionados sirvieron como control. La calidad del esperma se evaluó en función de los patrones de motilidad, morfología, integridad funcional de la membrana, viabilidad, especies reactivas de oxígeno (ROS), glutatión (GSH) e integridad del ADN. Posteriormente, se comparó el grupo más exitoso en el experimento anterior y el lavado por centrifugación (WC) en cuanto a patrones de motilidad y fertilización utilizando oocitos de cerdo. El swim-up disminuyó la motilidad y aumentó las ROS en comparación con el control. La centrifugación antes del swim-up perjudicó la integridad y la viabilidad en comparación con el control. PG 45-90% (96.8 vs. 69.7 vs. 40.7 um/s) permitió una mejor velocidad promedio de trayectoria (VAP), una mejor velocidad en línea recta y mejor linealidad (LIN) que los del control y PG 35-70% (88.4 vs. 56.0 vs. 27.3 um/s). Por lo tanto, se utilizó PG 45-90% para la fertilización. PG 45-90% obtuvo un VAP más alto, una mayor amplitud de la cabeza lateral, rectitud y un LIN más alto que los del control y WC. Las tasas de segmentación (25.2-26.3%) y de mórula (8.1-10.5%) no difirieron entre los grupos. Por lo tanto, PG 45-90% y WC fueron eficientes en la aislamiento de espermatozoides de pecarí con collar capaces de fertilizar oocitos de cerdo.