La oxitocina es una hormona involucrada en el vínculo social y la regulación del estrés que ha atraído un gran interés en la investigación sobre el bienestar animal. Sin embargo, nunca antes se había medido en heces, un método que permitiría un monitoreo no invasivo. Este estudio investigó si la oxitocina puede ser detectada de manera consistente en muestras fecales, utilizando leones como especie modelo. Los objetivos eran desarrollar un método confiable para extraer y medir la oxitocina fecal, describir patrones típicos de esta hormona en leones en cautiverio y examinar su relación con las concentraciones de metabolitos de glucocorticoides en heces. Se recolectaron muestras de dieciséis leones en cinco zoológicos españoles. La oxitocina se midió con éxito en heces con el método de extracción desarrollado, con una variación considerable entre individuos y zoológicos. La edad, el sexo y el estado anticonceptivo no influyeron significativamente en los niveles de oxitocina, pero las concentraciones diferían entre zoológicos. No se encontró un patrón consistente entre la oxitocina y los metabolitos fecales de glucocorticoides bajo condiciones de alojamiento y sociales estables. Estos hallazgos proporcionan evidencia inicial de que la oxitocina puede medirse en heces, aunque varios aspectos metodológicos aún deben ser investigados. En general, este enfoque no invasivo muestra promesas como herramienta para evaluar el estrés y el bienestar tanto en animales salvajes como domésticos.