Una metodología de PCR diferencial y qPCR confiable y estandarizable evalúa la amplificación del gen HER2 en el cáncer gástrico
Autores: Juarez, Ignacio; Toro-Fernandez, Juan Francisco; Vaquero-Yuste, Christian; Molina-Alejandre, Marta; Lasa, Inmaculada; Gomez, Remedios; Lopez, Adela; Martin-Villa, Jose Manuel; Gutierrez, Alberto
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2021
Acceso abierto
Artículo científico
2021
Una metodología de PCR diferencial y qPCR confiable y estandarizable evalúa la amplificación del gen HER2 en el cáncer gástrico
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Técnicas de pcr
Amplificaciones del gen her2
DiffPCR
QPCR
Inmunohistoquímica
Inmunofluorescencia
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 30
Citaciones: Sin citaciones
Hemos aplicado dos técnicas de PCR, PCR diferencial (diffPCR) y qPCR, para la identificación de amplificaciones del gen HER2 en ADN genómico de muestras tumorales y distales gástricas de pacientes con cáncer gástrico. La técnica diffPCR consiste en la amplificación simultánea del gen HER2 y un gen de referencia mediante PCR convencional y el análisis densitométrico de las bandas obtenidas. Establecimos un punto de corte basado en la media y la desviación estándar analizando el ADN de 30 tejidos gástricos de pacientes sometidos a gastrectomía no oncológica. diffPCR y qPCR arrojaron resultados consistentes. Se detectó sobreexpresión de HER2 en el 25% de los pacientes, lo cual fue confirmado adicionalmente por inmunohistoquímica e inmunofluorescencia. Los enfoques aquí descritos pueden servir como métodos complementarios y fiables para evaluar la amplificación de HER2.
Descripción
Hemos aplicado dos técnicas de PCR, PCR diferencial (diffPCR) y qPCR, para la identificación de amplificaciones del gen HER2 en ADN genómico de muestras tumorales y distales gástricas de pacientes con cáncer gástrico. La técnica diffPCR consiste en la amplificación simultánea del gen HER2 y un gen de referencia mediante PCR convencional y el análisis densitométrico de las bandas obtenidas. Establecimos un punto de corte basado en la media y la desviación estándar analizando el ADN de 30 tejidos gástricos de pacientes sometidos a gastrectomía no oncológica. diffPCR y qPCR arrojaron resultados consistentes. Se detectó sobreexpresión de HER2 en el 25% de los pacientes, lo cual fue confirmado adicionalmente por inmunohistoquímica e inmunofluorescencia. Los enfoques aquí descritos pueden servir como métodos complementarios y fiables para evaluar la amplificación de HER2.