El instrumento tradicional de qPCR se combina con CMOS y una computadora personal, y se diseña un sistema de detección automática de fluorescencia con retroalimentación fotoeléctrica para realizar PCR cuantitativa en tiempo real. La clave para la eficiencia de la reacción radica en cómo asegurar que la temperatura del reactivo de detección coincida completamente con la temperatura establecida. Sin embargo, para la mayoría de los sistemas tradicionales de PCR fluorescente en tiempo real, el ciclo de temperatura se controla mediante la detección de la temperatura de la placa calefactora. No puede medir directamente la temperatura en el tubo de PCR del reactivo de reacción, lo que causará desviaciones en la temperatura real del reactivo respecto a lo esperado. Por lo tanto, en este documento, planteamos un método para detectar directamente la temperatura en el tubo de reacción del reactivo durante el ciclo de temperatura. Según la desviación del valor esperado, se ajusta la temperatura establecida del instrumento de PCR para que la temperatura real del reactivo se acerque al valor esperado. A través de este método, también logramos la calibración y optimización de la circulación del sistema TEC que construimos. Los experimentos muestran que este sistema de PCR cuantitativa en tiempo real, portátil y de bajo costo, puede detectar y analizar patógenos in situ.