Método mejorado para extracción y purificación de ADN de
Autores: El Maaiden, Ezzouhra; El Kharrassi, Youssef; Essamadi, Abdel Khalid; Moustaid, Khadija; Nasser, Boubker
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2019
Acceso abierto
Artículo científico
2019
Método mejorado para extracción y purificación de ADN de
Categoría
Ingeniería y Tecnología
Subcategoría
Bioingeniería
Palabras clave
(protozoos)
Organismo modelo
Extracción de ADN
Surfactante mixto
Eficiencia
Aplicaciones moleculares
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 26
Citaciones: Sin citaciones
(protozoa) se investiga intensamente como organismo modelo, ofreciendo numerosas ventajas en estudios exhaustivos y multidisciplinarios utilizando métodos morfológicos o moleculares. Dado que la extracción de ADN es un paso vital en cualquier experimento molecular, aquí se adoptó un nuevo surfactante mixto (Sulfato dodecílico de sodio (SDS) 20%/Tritón X-100) para una extracción efectiva de ADN bajo un protocolo fácil y rápido. La eficacia de esta técnica se comparó luego con tres técnicas alternativas ampliamente utilizadas, a saber, la matriz Chelex 100, el complejo de Ammonium pyrrolidine ditiocarbamato (APD) y los métodos de SDS-cloroformo. La extracción de ADN se analizó mediante electroforesis en gel de campo pulsado, medición espectral, fluorometría (Qubit), digestión con enzimas de restricción y reacción en cadena de la polimerasa. El análisis de datos reveló que la cantidad y calidad del ADN recuperado variaban dependiendo del método de extracción de ADN aplicado. El nuevo método (SDS 20%/Tritón X-100) fue el más eficiente para extraer ADN con alta integridad y pureza, costo asequible, menos tiempo y adecuado para aplicaciones moleculares.
Descripción
(protozoa) se investiga intensamente como organismo modelo, ofreciendo numerosas ventajas en estudios exhaustivos y multidisciplinarios utilizando métodos morfológicos o moleculares. Dado que la extracción de ADN es un paso vital en cualquier experimento molecular, aquí se adoptó un nuevo surfactante mixto (Sulfato dodecílico de sodio (SDS) 20%/Tritón X-100) para una extracción efectiva de ADN bajo un protocolo fácil y rápido. La eficacia de esta técnica se comparó luego con tres técnicas alternativas ampliamente utilizadas, a saber, la matriz Chelex 100, el complejo de Ammonium pyrrolidine ditiocarbamato (APD) y los métodos de SDS-cloroformo. La extracción de ADN se analizó mediante electroforesis en gel de campo pulsado, medición espectral, fluorometría (Qubit), digestión con enzimas de restricción y reacción en cadena de la polimerasa. El análisis de datos reveló que la cantidad y calidad del ADN recuperado variaban dependiendo del método de extracción de ADN aplicado. El nuevo método (SDS 20%/Tritón X-100) fue el más eficiente para extraer ADN con alta integridad y pureza, costo asequible, menos tiempo y adecuado para aplicaciones moleculares.