Establecimiento de un método de transformación genética y edición de genes mediante inmersión floral en
Autores: Jia, Tianjiao; Yang, Hua; Zhou, Dingding; Zhao, Sanzeng; Wang, Jianyong; Zhang, Tao; Huang, Mingkun; Kong, Danyu; Liu, Yi
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2024
Acceso abierto
Artículo científico
2024
Establecimiento de un método de transformación genética y edición de genes mediante inmersión floral en
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Medicina tradicional
Transformación genética
Eficiente
CRISPR/Cas9
Función del gen
Investigación
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 10
Citaciones: Sin citaciones
L. Webb ex Prantl se utiliza en la medicina tradicional a nivel mundial. Sin embargo, la falta de un sistema de transformación genética eficiente y confiable ha limitado seriamente la investigación de la función de los genes y su posterior utilización. En este estudio, se ha desarrollado un sistema de transformación genética mediado por - que es altamente eficiente, ahorra tiempo y es rentable. En este método, la transformación se logró simplemente sumergiendo inflorescencias en desarrollo durante 45 segundos en una suspensión (OD = 0.6) que contenía 5% de sacarosa y 0.03% de Silwet L-77. Las plantas tratadas se dejaron producir semillas que luego se sembraron en un medio selectivo con higromicina B (HygB) para seleccionar los transformantes. Además, se validó el sistema de edición genómica CRISPR/Cas9 al dirigir el gen desaturasa de fitoeno utilizando este método de inmersión floral, y se pudieron obtener plantas mutantes con el fenotipo albino esperado en 2.5 meses. Este sistema de transformación genética y edición dirigida será una herramienta valiosa para la investigación rutinaria de la función de los genes y su posterior explotación.
Descripción
L. Webb ex Prantl se utiliza en la medicina tradicional a nivel mundial. Sin embargo, la falta de un sistema de transformación genética eficiente y confiable ha limitado seriamente la investigación de la función de los genes y su posterior utilización. En este estudio, se ha desarrollado un sistema de transformación genética mediado por - que es altamente eficiente, ahorra tiempo y es rentable. En este método, la transformación se logró simplemente sumergiendo inflorescencias en desarrollo durante 45 segundos en una suspensión (OD = 0.6) que contenía 5% de sacarosa y 0.03% de Silwet L-77. Las plantas tratadas se dejaron producir semillas que luego se sembraron en un medio selectivo con higromicina B (HygB) para seleccionar los transformantes. Además, se validó el sistema de edición genómica CRISPR/Cas9 al dirigir el gen desaturasa de fitoeno utilizando este método de inmersión floral, y se pudieron obtener plantas mutantes con el fenotipo albino esperado en 2.5 meses. Este sistema de transformación genética y edición dirigida será una herramienta valiosa para la investigación rutinaria de la función de los genes y su posterior explotación.