En este estudio, describimos la diversidad de Mesembrinelinae en una reserva biológica en la ciudad de Nova Iguaçu, Estado de Río de Janeiro. Las trampas con sardinas se distribuyeron estacionalmente en cuatro sitios: Sitio A (22° 58.788’ S, 43° 43.459’ O), en el borde del bosque, y los sitios B (22° 58.523’ S, 43° 44.540’ O), C (22° 58.350’ S, 43° 44.678’ O) y D (22° 34.865’ S, 43° 27.063’ O), ubicados a 1000 m, 500 m y 2000 m respectivamente, hacia el interior del borde. Se recolectaron un total de 2150 individuos de Mesembrinelinae, que representan diez especies. Laneela nigripes Guimarães, 1977 fue la especie más abundante, seguida de Mesembrinella bellardiana Aldrich, 1922, Eumesembrinella cyaneicincta (Surcouf, 1919) y Mesembrinella semihyalina Mello, 1967. Estas especies fueron comunes y constantes durante el período de estudio. Mesembrinella batesi Aldrich, 1922, Eumesembrinella quadrilineata (Fabricius, 1805) y Huascaromusca aeneiventris (Wiedmann, 1830) fueron las moscas menos abundantes, considerándose raras y accidentales. Eumesembrinella besnoiti (Seguy, 1925) fue rara y accesoria. Eumesembrinella cyaneicincta, M. bellardiana, M. semihyalina y M. bicolor se recolectaron principalmente en el sitio B, mientras que L. nigripes se recolectó principalmente en el sitio C. El efecto de borde no fue evidente, ya que los cuatro sitios mostraron poblaciones similares. El sitio B mostró una fuerte relación positiva entre abundancia y riqueza; en el sitio C, la correlación fue positiva y débil, y no hubo correlación en los sitios A y D. La mayor abundancia de especímenes se registró durante el otoño y el invierno. Estas moscas se encontraron desde el borde hasta los 2000 m dentro del bosque.