El óxido nítrico (NO) es una molécula de señalización multifuncional en las plantas, desempeñando roles clave en la germinación, la simbiosis microbiana y la formación de nódulos. Sin embargo, su inestabilidad requiere enfoques innovadores, como el uso de donantes de NO nanoencapsulados, para prolongar sus efectos. Este estudio evaluó el impacto del tratamiento de semillas de soja con el donante de NO S-nitrosoglutación (GSNO), encapsulado en nanopartículas poliméricas, sobre la germinación, la nodulación y el crecimiento de las plantas. Las semillas fueron tratadas con GSNO libre, nanopartículas de quitosano con/sin NO (NP CS-GSNO/NP CS-GSH, donde GSH es glutatión, el precursor del donante de NO) y nanopartículas de alginato con/sin NO (NP Al-GSNO/NP Al-GSH). Las nanopartículas de quitosano (potencial zeta positivo) eran más pequeñas y liberaban NO más rápido en comparación con las nanopartículas de alginato (potencial zeta negativo). El tratamiento de semillas con NP CS-GSNO (1 mM, relacionado con la concentración de GSNO) mejoró significativamente el porcentaje de germinación, la longitud de la raíz, el número de raíces secundarias y la masa seca de la raíz de soja en comparación con el control. Por el contrario, NP CS-GSH resultó en una disminución de la longitud de la raíz y del brote. NP Al-GSNO mejoró la masa seca del brote y aumentó el número de raíces secundarias aproximadamente tres veces en las concentraciones más altas. NP CS-GSNO, NP Al-GSNO y NP Al-GSH aumentaron los niveles de S-nitrosotioles en las raíces aproximadamente cuatro veces en comparación con el control. Sin embargo, NP CS-GSNO fue el único tratamiento que aumentó la masa seca de los nódulos de las plantas de soja. Por lo tanto, nuestros resultados indican el potencial de las nanopartículas de quitosano para mejorar la aplicación de donantes de NO en semillas de soja.