La inseminación artificial 12 horas después del estro observado es una estimación estándar de los niveles de fertilidad en el ganado. El objetivo principal de este estudio fue determinar si el control del desarrollo ovárico con un programa de fertilidad podría alterar la fertilidad de las vacas lecheras en lactancia. Las vacas lecheras en lactancia (n = 1356) con 60-66 días en leche (DIM) fueron asignadas aleatoriamente para recibir IA programada tras Presynch-11/Ovsynch (Presynch-11) o una combinación de detección de estro e IA programada utilizando el programa Presynch-11/Ovsynch (Estro + TAI). Las vacas en estro observado, tras las dos primeras inyecciones de cloprostenol sódico (CLO), en el grupo Estro + TAI fueron inseminadas artificialmente utilizando la regla AM/PM. Las vacas de este grupo que no fueron observadas en estro recibido Ovsynch y TAI comenzando 11 días después de la segunda inyección de CLO. Las vacas en el grupo Presynch-11 recibieron dos inyecciones de 500 ug de CLO con 14 días de diferencia, pero no fueron observadas para detectar estro. La primera GnRH (100 ug) de Ovsynch se administró 11 días después de la segunda inyección de CLO. Todas las vacas en el grupo Presynch-11-Ovsynch recibieron TAI tras Ovsynch. Las vacas en este tratamiento fueron asignadas aleatoriamente para recibir CLO o dinoprost 7 días después de la primera GnRH de Ovsynch. La GnRH final de Ovsynch se administró 56 horas después y TAI 16 horas después de la GnRH final. Los embarazos/IA (P/IA) fueron mayores (< 0.001) para el grupo Presynch-11 en comparación con el grupo Estro + TAI (45 vs. 31%). Las vacas primíparas tuvieron mayor fertilidad tras el estro observado en comparación con las vacas multiparas. Los días en leche en la primera IA fueron mayores (< 0.01) en el grupo Presynch-11 frente al grupo Estro + TAI (98 vs. 80) pero menos variables (< 0.01). El rango de DIM en la primera IA fue de 95 a 101 en el grupo Presynch-11 y de 60 a 101 en el grupo Estro + TAI. Dentro del grupo Presynch-11, no hubo diferencias en la tasa de luteólisis o P/IA para el tipo de prostaglandina en el PGF final de Ovsynch. Las vacas multiparas tratadas con Presynch-11 tuvieron más del 60% de probabilidad de embarazo en comparación con las vacas multiparas que recibieron IA tras el estro observado. En resumen, las vacas lecheras en lactancia que recibieron IA programada tras el programa Presynch-11/Ovsynch tuvieron una fertilidad mejorada en comparación con un grupo de vacas que recibieron IA tras el estro observado o, si no se observaron en estro, IA programada. Esta comparación indicó que el control del desarrollo ovárico con GnRH y PGF impactó positivamente la fertilidad de las vacas lecheras en lactancia.