Debido a su alto valor ornamental, medicinal y hortícola, la peonía herbácea (Pall.) se ha utilizado ampliamente como planta de paisajismo y económica en todo el mundo. Sin embargo, la falta de un sistema de regeneración eficiente y estable limita su rápida propagación y producción a gran escala. Al probar los factores clave que afectan la formación de callos, la proliferación, la inducción de brotes adventicios y el enraizamiento, aquí desarrollamos un sistema in vitro para la inducción de callos y regeneración en . Nuestros resultados muestran que la formación de callos se vio afectada por los tipos de explantes, el ambiente de cultivo, el medio basal y los reguladores del crecimiento de las plantas. Usando cotiledones como explantes, establecimos buenas condiciones para la inducción y proliferación de callos. Obtuvimos efectivamente brotes adventicios diferenciados de callos en medio de Murashige y Skoog (MS) que contenía kinetina (KT) y tídiazurón (TDZ). El crecimiento de los brotes adventicios se puede promover aún más añadiendo ácido giberélico 3 (GA), ácido 1-naftalenacético (NAA) y 6-benzilaminopurina (6-BA) al medio MS. Se puede lograr un alto porcentaje de enraizamiento añadiendo ácido indolbutírico (IBA) y carbón activado (AC) al medio ½ MS. En general, nuestro sistema promueve la inducción de callos y la regeneración de brotes adventicios a través de condiciones de cultivo mejoradas y reguladores del crecimiento de las plantas en los medios de cultivo, y sienta las bases para investigaciones posteriores en ingeniería genética.