La criopreservación del esperma felino es una herramienta importante para la reproducción asistida y los programas de conservación en felinos domésticos y salvajes. Este estudio investigó un método de vitrificación simplificado, sin crioprotectores permeantes, utilizando disacáridos (sacarosa y trehalosa) y evaluó los factores que influyen en la calidad del esperma después del calentamiento. Los hallazgos demostraron que la vitrificación optimizada utilizando 0.5 M de trehalosa, combinada con un protocolo de mezcla rápida, preservó la motilidad y viabilidad del esperma y apoyó la fertilización y el desarrollo temprano del embrión. Este enfoque ofreció una alternativa práctica para la criopreservación del esperma felino en entornos clínicos y de campo.