Los folículos poliovulares se definen como aquellos que tienen más de un oocito presente en folículos individuales. La frecuencia de aparición de este tipo de folículo es mayor en caninos que en otras especies. Este estudio tuvo como objetivo evaluar la maduración meiótica in vitro de oocitos de perro de este tipo de folículo en comparación con los de folículos monoovulares de varios tamaños (antral pequeño, antral mediano y antral grande) considerando diferentes fases del ciclo estral (anestro, proestro, estro y diestro). Se obtuvieron oocitos caninos por separado de los folículos antrales poliovulares y monoovulares de los ovarios de hembras adultas. En cada réplica experimental, los complejos cumulus-oocito (COCs) de folículos poliovulares y monoovulares se incubaron en TCM-199 suplementado a 38.5 grados C y 5% de CO durante 72 h. Después de la cultivos, se evaluó el desarrollo meiótico de cada oocito utilizando microscopía de epifluorescencia. Las etapas meióticas se clasificaron en vesícula germinal (GV), ruptura de la vesícula germinal (GVBD), primera metafase (MI) y segunda metafase (MII). Los datos se evaluaron utilizando un análisis de varianza. Los oocitos de folículos poliovulares en todas las fases mostraron un porcentaje más alto (< 0.05) de oocitos arrestados en la etapa GV que los de folículos monoovulares, mostrando la tasa más alta de GV en folículos antrales pequeños durante el anestro. En contraste, no hubo diferencias en las tasas de MII (< 0.05) en oocitos de folículos monoovulares y poliovulares durante las fases de estro y diestro en todos los tamaños evaluados, con la tasa más alta de MII en estro. Estos resultados sugieren que los oocitos de folículos poliovulares pueden reanudar la meiosis a un ritmo más lento que los de folículos monoovulares; sin embargo, la maduración in vitro de tales oocitos es posible. Además, la relación entre la capacidad de maduración de los oocitos de folículos poliovulares y monoovulares depende del ciclo ovárico y del desarrollo folicular.