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Mediciones en Tiempo Real de Unión de Proteínas y Células en Recubrimientos de Hidroxiapatita

Autores: Vilardell, A. M.; Cinca, N.; Jokinen, A.; Garcia-Giralt, N.; Dosta, S.; Cano, I. G.; Guilemany, J. M.

Idioma: Inglés

Editor: MDPI

Año: 2016

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Acceso abierto

Artículo científico
2016

Mediciones en Tiempo Real de Unión de Proteínas y Células en Recubrimientos de Hidroxiapatita


Categoría

Ciencias de los Materiales

Subcategoría

Materiales para aplicaciones biomédicas

Palabras clave

Hidroxiapatita
Mediciones de interacción
MP-SPR
Viabilidad celular
Adsorción de proteínas
Adherencia celular

Licencia

CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual

Consultas: 17

Citaciones: Sin citaciones


Descripción
Aunque se han realizado muchos ensayos in vitro e in vivo durante las últimas décadas para recubrimientos bioactivos de hidroxiapatita, hay una falta de explotación de mediciones de interacción in vitro en tiempo real. En el presente trabajo, se midieron interacciones en tiempo real para un recubrimiento de hidroxiapatita pulverizado por plasma mediante un Resonancia de Plasmones Superficiales Multi-Paramétrica (MP-SPR), y los resultados se compararon con ensayos tradicionales de viabilidad celular in vitro. Se ha demostrado que el MP-SPR es adecuado no solo para la medición de interacciones molécula-molécula, sino también para mediciones de interacción molécula-material e interacción celular. Aunque el SPR se utiliza ampliamente en estudios de interacción, no se encontraron investigaciones recientes sobre la adsorción de proteínas o células en recubrimientos de hidroxiapatita para aplicaciones en prótesis. El recubrimiento de hidroxiapatita pulverizado resultó en un 62.4% de fase cristalina y un grosor promedio de 24 +/- 6 m. Se utilizó el MP-SPR para medir la interacción de la proteína lisozima y células madre mesenquimatosas humanas con el recubrimiento de hidroxiapatita. Una comparación entre el sensor de oro estándar y el sensor recubierto de hidroxiapatita (HA) denotó una clara preferencia de adherencia celular en el sensor recubierto de HA, ya que se detectó una señal de unión celular significativamente más alta. Además, las pruebas tradicionales de viabilidad celular y proliferación mostraron una actividad aumentada con el tiempo de cultivo, lo que indica que las células estaban proliferando en el recubrimiento de HA. Las células mostraron una distribución homogénea y proliferación a lo largo de la superficie de HA entre uno y siete días sin mortalidad significativa. Las células se aplanaron y se extendieron sobre superficies rugosas desde el primer día, con un aumento de las extensiones citoplasmáticas durante el tiempo de cultivo.

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