La integridad corneal es crítica para la visión. Las heridas corneales a menudo sanan con cicatrices que afectan la visión. Recientemente, se han investigado las células madre mesenquimatosas del cordón umbilical (células madre del cordón) para la ingeniería de tejidos y la terapia debido a su disponibilidad y potencial de diferenciación. En este estudio, utilizamos células madre del cordón en un modelo tridimensional (3D) similar al estroma para observar la organización de la matriz extracelular, con fibroblastos corneales humanos actuando como control. Durante 4 semanas, las células fueron estimuladas con un derivado estable de vitamina C (VitC) +/- TGF-beta1. Después de 4 semanas, el grosor medio de los constructos fue de 30 m; sin embargo, los constructos de células madre del cordón tenían un 50% menos de células por unidad de volumen, lo que indica la formación de una matriz densa. Encontramos un cambio mínimo en el ARNm de decorina y lumicana, y un aumento significativo en el ARNm de perlecano en presencia de TGF-beta1. Por otro lado, el queratocano disminuyó con TGF-beta1 en ambas líneas celulares. Con ambos tipos de células, los constructos poseían fibrillas de colágeno alineadas y glicosaminoglicanos asociados. Los diámetros de las fibrillas no cambiaron con la estimulación de TGF-beta1 o la línea celular; sin embargo, los glicosaminoglicanos altamente sulfatados asociados con las fibrillas de colágeno aumentaron significativamente con TGF-beta1. En general, hemos demostrado que las células madre del cordón pueden secretar su propia matriz extracelular y promover la deposición y sulfatación de varios proteoglicanos. Además, estas células son al menos comparables a los fibroblastos corneales comúnmente utilizados y presentan una alternativa para el modelo de tejido ingenierizado en 3D.