La evaluación de la calidad nutricional del maíz forrajero (L.) depende en gran medida de su contenido de aceite, un rasgo cuantitativo complejo influenciado por múltiples genes. La búsqueda de genes candidatos dentro de los loci de rasgos cuantitativos (QTL) relacionados con el contenido de aceite puede proporcionar recursos genéticos y una base teórica para cultivar variedades de maíz forrajero de alto contenido de aceite. Este estudio empleó 274 líneas haploides dobles (DH) derivadas de las líneas parentales BY4944 y DNF34-2 para realizar un análisis genético mixto de genes principales más poligenes y un mapeo de intervalos complejos (CIM), con el objetivo de identificar QTLs y genes relacionados con el contenido de aceite distribuidos en el genoma de L. Aprovechando 5400 polimorfismos de un solo nucleótido (SNPs), se construyó un mapa de enlace genético de maíz forrajero de alta resolución que abarca 3864.51 cM, con un intervalo promedio entre marcadores de 0.74 cM. El análisis del mapa reveló 13 QTLs relacionados con el contenido de aceite. El QTL de mayor efecto significativo (qOIL-1-1), ubicado en el cromosoma 1 dentro de la región que abarca de 240.93 Mb a 256.57 Mb, mostró un puntaje de logaritmo de probabilidades (LOD) de 3.34 y explicó el 5.06% de la variación fenotípica relacionada con el contenido de aceite. Dentro de estos QTLs, se anotaron 617 genes. A través del análisis de transcriptoma combinado con la reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa en tiempo real (RT-qPCR), se predijeron cinco genes candidatos potencialmente asociados con el contenido de aceite y se validaron posteriormente dentro de estos loci genéticos. Esta investigación subraya el potencial de identificar genes candidatos para mejorar los esfuerzos de cría destinados a aumentar el contenido de aceite, avanzando así en las prácticas de ganadería.