La rápida expansión de la industria del cannabis en Canadá tras la legalización ha aumentado la prevalencia de plagas, particularmente el pulg del cannabis, que representa amenazas significativas para la salud de los cultivos. Este estudio investiga los efectos inmediatos sobre las plantas de cannabis y explora estrategias de control biológico utilizando hongos entomopatógenos. Se aislaron, cultivaron y caracterizaron aislamientos fúngicos de pulg infectado. Las pruebas de infección en pulg revelaron que ambos hongos lograron una mortalidad del 100% en pulg a altas concentraciones de conidios (1 x 10 conidios/mL) para el décimo día después del tratamiento, con uno de ellos demostrando mejor eficacia. En ensayos en invernadero con tres variedades de cannabis, se controlaron eficazmente las poblaciones de pulg, manteniendo niveles bajos y estables en plantas infestadas tratadas con el hongo a la concentración de 1 x 10 conidios/mL y en plantas infestadas tratadas con insecticida. Ambos tratamientos mantuvieron las poblaciones de pulg cerca de cero durante nueve semanas. En contraste, las plantas de control mostraron un crecimiento significativo de pulg, siendo la variedad Perseid la más susceptible, seguida de Congo Durban, mientras que GCC mostró la menor susceptibilidad. Los análisis de cannabinoides y terpenos revelaron que el tratamiento con insecticida disminuyó sustancialmente la cantidad de cannabinoides y terpenos producidos. En contraste, las plantas tratadas con el hongo exhibieron concentraciones más altas de metabolitos clave, incluyendo ácido delta-9-tetrahidrocannabinólico y ácido cannabidiólico, y terpenos totales, en comparación con las plantas tratadas químicamente, y en dos de las tres variedades, estas concentraciones fueron más altas que en las plantas de control no tratadas. Los hallazgos destacan el uso de hongos entomopatógenos como una alternativa ecológica para el manejo de plagas que no solo controla eficazmente los pulg, sino que también apoya la calidad bioquímica de las plantas de cannabis.