La aplicación de pesticidas en la agricultura conduce a una mejor calidad de los cultivos y promueve una alta productividad. Sin embargo, el uso ininterrumpido de estos productos químicos está directamente relacionado con impactos ambientales, afectando la biodiversidad y la salud de los ecosistemas y los seres humanos. En este sentido, los lípidos de mannosil eritritol (MELs) son una alternativa prometedora, ya que son biosurfactantes con características antimicrobianas, anfifílicas y baja toxicidad. Por lo tanto, en busca de una reducción parcial en el uso de pesticidas químicos en la agricultura, este trabajo tuvo como objetivo evaluar el efecto biestimulante de uno de los homólogos de MELs-MEL-B en la germinación de semillas de lechuga Mónica (L.) y la influencia en el crecimiento de las plantas y el desarrollo de las raíces. Las semillas germinaron en diferentes concentraciones de MEL-B. Se evaluaron la incidencia de las semillas germinadas, el índice de germinación y el tiempo medio de germinación. MEL-B a 158 mg/L estimuló la germinación de las semillas, el crecimiento y los parámetros de desarrollo de plántulas en un 65%, mientras que las concentraciones de 316 y 632 mg/L no superaron el 45% para estos parámetros. Se observó que MEL-B a 158 mg/L biostimuló la aparición de raíces laterales y promovió solo un 7% de estrés en las raíces, una diferencia del 47% para las raíces cultivadas con MEL-B a 632 mg/L. Además, MEL-B a 158 mg/L fue la concentración más alta en la que no hubo efecto fitotóxico de MEL-B en las semillas. El aumento en la actividad enzimática corrobora el efecto fitotóxico y el estrés de las semillas en concentraciones de 316 y 632 mg/L, mostrando resultados del 47% y 54% de raíces estresadas. De manera sin precedentes, este estudio demostró que MEL-B tiene un efecto biestimulante y fitotóxico relacionado con su concentración.