Ante el desafío crítico de la resistencia a múltiples fármacos (MDR AB), un patógeno priorizado por la OMS, este estudio investiga la eficacia antibacteriana in vitro y el mecanismo del extracto crudo de una hierba medicinal étnica Miao. Utilizando 10 cepas clínicas de MDR AB, combinamos dilución en microcultivo, ensayos de muerte celular y microscopía electrónica para demostrar la actividad bactericida dependiente de la concentración (MIC = 640 g/mL) a través de la interrupción de la integridad de la pared celular/membrana. El análisis proteómico identificó proteínas relacionadas con la membrana externa que estaban reguladas a la baja (msbA, lptD), validadas por acoplamiento molecular como objetivos de linarina/hyperósido (MIC = 312.5 mol/L). La qPCR confirmó una regulación a la baja significativa del ARNm de lptD/msbA (< 0.05), vinculando los flavonoides con la desestabilización de la membrana externa. Este trabajo revela por primera vez que la linarina y el hyperósido combaten el MDR AB al inhibir genes esenciales para la biogénesis de la membrana, ofreciendo nuevos candidatos para el desarrollo de compuestos naturales con efectos antibacterianos.