Los efectos neuroprotectores de los ligandos TSPO CB86 y CB204 sobre la muerte celular inducida por 6-OHDA en células PC12 como un modelo in vitro para la enfermedad de Parkinson
Autores: Monga, Sheelu; Denora, Nunzio; Laquintana, Valentino; Yashaev, Rami; Weizman, Abraham; Gavish, Moshe
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2021
Acceso abierto
Artículo científico
2021
Los efectos neuroprotectores de los ligandos TSPO CB86 y CB204 sobre la muerte celular inducida por 6-OHDA en células PC12 como un modelo in vitro para la enfermedad de Parkinson
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Enfermedad de Parkinson
Neurodegeneración
Estrés oxidativo
Ligandos de tspo
Muerte celular
Apoptosis
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 20
Citaciones: Sin citaciones
La enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno neurodegenerativo progresivo que se caracteriza por la degeneración de neuronas dopaminérgicas en la sustancia negra (SN). Se ha sugerido que el estrés oxidativo o la generación de especies reactivas de oxígeno (ERO) juegan un papel en este tipo específico de neurodegeneración. Las opciones terapéuticas que pueden dirigirse y contrarrestar la generación de ERO pueden ser beneficiosas. Se sabe que los ligandos de TSPO contrarrestan la neuroinflamación, la generación de ERO, la apoptosis y la necrosis. En el presente estudio, investigamos un modelo celular in vitro de EP mediante la evaluación de la neurotoxicidad inducida por 6-hidroxidopamina (6-OHDA, 80 uM) en células PC12. Simultáneamente a la exposición de las células a 6-OHDA, añadimos los ligandos de TSPO CB86 y CB204 (25 uM cada uno) y evaluamos el impacto en varios marcadores de muerte celular. Los dos ligandos normalizaron significativamente (57% y 52% respectivamente, desde 44%; mientras que el control fue del 68%) la proliferación celular en diferentes puntos de tiempo de 0 a 24 h. Además, evaluamos el efecto de estos dos ligandos de TSPO en la necrosis utilizando tinción con yoduro de propidio (PI) y encontramos que los ligandos inhibieron significativamente la necrosis inducida por 6-OHDA. En comparación con el control, el recuento rojo aumentó hasta 57 veces, mientras que CB86 y CB204 inhibieron hasta 2.7 veces y 3.2 veces respectivamente. La necrosis también se analizó mediante el ensayo de LDH, que mostró un efecto significativo. Ambos ensayos demostraron un efecto anti-necrótico potente similar de los dos ligandos de TSPO. La generación de especies reactivas de oxígeno (ERO) inducida por 6-OHDA también fue inhibida por los dos ligandos de TSPO hasta 1.3 y 1.5 veces respectivamente, en comparación con el grupo de 6-OHDA. CB86 y CB204 también normalizaron la viabilidad celular hasta 1.8 veces después de la exposición a 6-OHDA, según lo evaluado por el ensayo de XTT. Los dos ligandos de TSPO también inhibieron significativamente la apoptosis (1.3 veces para ambos) según lo evaluado por la tinción con apopxin verde. En resumen, parece que los dos ligandos de TSPO CB86 y CB204 pueden suprimir la muerte celular de PC12 inducida por 6-OHDA. Los resultados pueden ser relevantes para el uso de estos dos ligandos de TSPO como opción terapéutica en enfermedades neurodegenerativas como la EP.
Descripción
La enfermedad de Parkinson (EP) es un trastorno neurodegenerativo progresivo que se caracteriza por la degeneración de neuronas dopaminérgicas en la sustancia negra (SN). Se ha sugerido que el estrés oxidativo o la generación de especies reactivas de oxígeno (ERO) juegan un papel en este tipo específico de neurodegeneración. Las opciones terapéuticas que pueden dirigirse y contrarrestar la generación de ERO pueden ser beneficiosas. Se sabe que los ligandos de TSPO contrarrestan la neuroinflamación, la generación de ERO, la apoptosis y la necrosis. En el presente estudio, investigamos un modelo celular in vitro de EP mediante la evaluación de la neurotoxicidad inducida por 6-hidroxidopamina (6-OHDA, 80 uM) en células PC12. Simultáneamente a la exposición de las células a 6-OHDA, añadimos los ligandos de TSPO CB86 y CB204 (25 uM cada uno) y evaluamos el impacto en varios marcadores de muerte celular. Los dos ligandos normalizaron significativamente (57% y 52% respectivamente, desde 44%; mientras que el control fue del 68%) la proliferación celular en diferentes puntos de tiempo de 0 a 24 h. Además, evaluamos el efecto de estos dos ligandos de TSPO en la necrosis utilizando tinción con yoduro de propidio (PI) y encontramos que los ligandos inhibieron significativamente la necrosis inducida por 6-OHDA. En comparación con el control, el recuento rojo aumentó hasta 57 veces, mientras que CB86 y CB204 inhibieron hasta 2.7 veces y 3.2 veces respectivamente. La necrosis también se analizó mediante el ensayo de LDH, que mostró un efecto significativo. Ambos ensayos demostraron un efecto anti-necrótico potente similar de los dos ligandos de TSPO. La generación de especies reactivas de oxígeno (ERO) inducida por 6-OHDA también fue inhibida por los dos ligandos de TSPO hasta 1.3 y 1.5 veces respectivamente, en comparación con el grupo de 6-OHDA. CB86 y CB204 también normalizaron la viabilidad celular hasta 1.8 veces después de la exposición a 6-OHDA, según lo evaluado por el ensayo de XTT. Los dos ligandos de TSPO también inhibieron significativamente la apoptosis (1.3 veces para ambos) según lo evaluado por la tinción con apopxin verde. En resumen, parece que los dos ligandos de TSPO CB86 y CB204 pueden suprimir la muerte celular de PC12 inducida por 6-OHDA. Los resultados pueden ser relevantes para el uso de estos dos ligandos de TSPO como opción terapéutica en enfermedades neurodegenerativas como la EP.