La actividad antropogénica, particularmente la sobrepesca, ha llevado a un marcado declive en las poblaciones de peces comercialmente importantes en el río Cauca, afectando especialmente al Pataló. El objetivo de este estudio fue evaluar el daño en membranas, mitocondrias y ADN en semen de Pataló criopreservado con etilenglicol en tres concentraciones diferentes. Se analizaron los parámetros de motilidad espermática utilizando un sistema de análisis asistido por computadora; el cryodano se midió mediante citometría de flujo. En el semen descongelado, se registraron los valores más altos de motilidad total con 6% y 8% de etilenglicol. Sin embargo, los porcentajes más altos de daño mitocondrial y de membrana se observaron cuando se añadió 10% de etilenglicol. La fragmentación del ADN fue mayor con 6% de etilenglicol. Los resultados sugieren que 8% de etilenglicol es la criosolución más adecuada para la criopreservación del semen de Pataló, ya que ofrece un mejor equilibrio entre la motilidad espermática y la protección celular. Este estudio contribuye a la conservación de los recursos hidrobiológicos en Colombia y, por lo tanto, a la seguridad alimentaria y al sustento económico de las comunidades pesqueras.