El ornitorrinco es un mamífero anfibio, ovíparo y de alto valor de conservación que se encuentra únicamente en Australia. La bacteria zoonótica serovar Hardjo fue descubierta en ornitorrincos en estudios anteriores, pero se sabe poco sobre su epidemiología. Las muestras en el Banco de Suero de Ornitorrinco fueron analizadas en 2023 y los resultados se combinaron con registros históricos. Se encontraron anticuerpos contra el serovar Hardjo en el 50% de 464 muestras de suero de 411 ornitorrincos recolectados de 14 cuencas fluviales en el sureste de Australia entre 1981 y 2012; la prevalencia se mantuvo alta durante tres décadas en la población del río Shoalhaven. La seroprevalencia aumentó con la edad, sugiriendo exposición ambiental. Los ornitorrincos individuales tenían títulos persistentes, algunos durante seis años. Las hembras seropositivas lactaron, los juveniles fueron reclutados en la población y no hubo informes de leptospirosis clínica. Tres ornitorrincos necropsiados fueron seropositivos y presentaron nefritis leve con leptospiras en los túbulos renales. La alta seroprevalencia, los títulos persistentes, la falta de enfermedad, las lesiones renales leves y la colonización renal sugieren que el ornitorrinco puede ser un hospedador de mantenimiento. El ganado simpátrico tenía títulos del serovar Hardjo, pero la asociación espacial con los ornitorrincos seropositivos fue estadísticamente débil. Otras especies de vida silvestre mamíferas y ovejas también tienen títulos del serovar Hardjo; por lo tanto, se debe considerar una compleja red ecológica. Se recomienda un estudio a nivel de paisaje para evaluar adecuadamente las vías de transmisión y confirmar quién está infectando a quién.