Se ha informado que DREB está involucrado en el crecimiento de las plantas y en la respuesta a factores ambientales. Sin embargo, la función en el crecimiento y desarrollo no se ha elucidado en la alfalfa (L.), un forraje perenne tetraploide cultivado en todo el mundo. En este estudio, se caracterizó un ortólogo de DREB de la alfalfa y se nombró en consecuencia. DREB fue significativamente inducido por estrés abiótico. El factor de transcripción MsDREB1C residía en el núcleo y tenía actividad de auto-transactivación. La alfalfa sobreexpresada (OE) mostró un retraso en el crecimiento tanto en condiciones de días largos como de días cortos, lo que fue respaldado por una disminución de la actividad de gibberelina (GA) y un aumento en las líneas OE. De manera consistente, se detectó una disminución en la gibberelina activa (GA), sugiriendo un efecto negativo de DREB en la acumulación de GA en la alfalfa. Curiosamente, la calidad del forraje de las líneas OE fue mejor que la de las líneas WT, con mayor contenido de proteína cruda y menor contenido de lignina, lo que fue respaldado por un aumento en la relación hoja-tallo (LSR) y la represión de varios genes de síntesis de lignina (Cinnamate-4-hidroxilasa, 4-coumarato-CoA ligasa, y otros). Por lo tanto, este estudio reveló los efectos de la sobreexpresión de DREB en el crecimiento y la calidad del forraje mediante la modificación de la acumulación de GA y la síntesis de lignina, respectivamente. Nuestros hallazgos proporcionan un candidato valioso para mejorar los rasgos agronómicos críticos de la alfalfa, como la resistencia invernal y el valor alimenticio del forraje.