El valor comercial de los pepinos se ve influenciado por la presencia de espinas o tricomas en su fruto, mientras que los tricomas encontrados en otras partes de la planta son esenciales para proteger al pepino contra una variedad de estrés biótico y abiótico. En nuestra investigación, identificamos un mutante glabro a partir de líneas mutantes de pepino (L.) inducidas por EMS. Este mutante muestra un fenotipo glabro consistente en todos los órganos de la planta. Tras el análisis, se reveló que la mutación está gobernada por un único gen nuclear recesivo. Las plantas muestran una reducción significativa tanto en su capacidad fotosintética como en el contenido de clorofila a en comparación con el tipo silvestre. Además, hay cambios notables en las actividades de las enzimas antioxidantes, los niveles de proteínas solubles y el contenido de malondialdehído del mutante. Los enfoques de genotipado y MutMap identificaron al gen, que codifica una proteína VPS, como un candidato responsable del rasgo glabro. El análisis del transcriptoma indicó que 15 genes relacionados con los tricomas muestran cambios significativos en la expresión en el mutante, lo que implica que pueden regular el desarrollo de los tricomas a través de interacciones con estos genes. Este estudio contribuye a la comprensión de las proteínas VPS en la iniciación de los tricomas y los mecanismos subyacentes del desarrollo de los tricomas.