El yodo es un elemento traza crítico necesario para la salud humana y animal debido a su papel en la síntesis de hormonas tiroideas. A pesar de su importancia, la deficiencia de yodo sigue siendo una preocupación de salud global. Los métodos tradicionales para abordar este problema, como la yodación de la sal, enfrentan desafíos como la pérdida de yodo durante el almacenamiento y la cocción. La biofortificación de plantas, especialmente zanahorias, ofrece una alternativa prometedora. Este estudio investiga la acumulación y distribución de yodo en zanahorias biofortificadas con yoduro de potasio (KI) y yodato de potasio (KIO) utilizando una extracción única a temperaturas elevadas con hidróxido de tetrametilamonio seguido de la determinación de yodo por ICP-MS. Los resultados muestran que la biofortificación con yodo aumenta significativamente el contenido de yodo en varias partes de la zanahoria, especialmente en las hojas y las cáscaras de la raíz. Las zanahorias tratadas con yodato acumulan 2.7 veces más yodo que las tratadas con yoduro. Las hojas presentan el contenido de yodo más alto, especialmente en las plantas tratadas con yodato, donde los niveles pueden ser más de 24 veces más altos que los de las zanahorias de control. La cáscara de la raíz y las raíces también acumulan cantidades sustanciales de yodo, con el tratamiento de yodato resultando en 5.42 mg·kg y 3.75 mg·kg de peso seco, respectivamente. La aplicación potencial de zanahorias biofortificadas puede ayudar a cumplir con los requisitos dietéticos de yodo en humanos; además, las hojas de zanahoria ricas en yodo como alimento para el ganado ofrecen un enfoque sostenible para aumentar la ingesta de yodo en los animales.