En este estudio, investigamos los efectos de la irradiación gamma en la actividad antioxidante y los perfiles de metabolitos de los callos (PC3012). La irradiación gamma a diversas dosis (0, 0.05, 0.5 y 10 kGy) mejoró significativamente las actividades de captura de radicales 1,1-difenil-2-picrilhidrazilo (DPPH) y 2,2-azino-(3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfónico (ABTS) de los extractos de callo de PC3012 de manera dependiente de la dosis. Los análisis de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) y cromatografía líquida de ultra rendimiento-espectrometría de masas con tiempo de vuelo cuadrupolar (UPLC-Q-TOF/MS) revelaron que la irradiación aumentó el contenido de lisofosfolípidos, aunque no se formaron nuevos compuestos antioxidantes. Además, un análisis PLS-DA reveló diferencias metabólicas evidentes entre muestras no irradiadas e irradiadas, que fueron verificadas mediante validación estadística. Estos hallazgos sugieren que la irradiación gamma induce modificaciones bioquímicas específicas que mejoran las propiedades bioactivas de los callos de PC3012. Esta tecnología muestra potencial para su utilización en los sectores de productos naturales y alimentos, particularmente en el desarrollo de alimentos funcionales y nutracéuticos con beneficios para la salud mejorados.