Este estudio investigó la transmisión de virus de la vid, específicamente el virus de manchas rojas de la vid (GRBV) y el virus de Pinot gris de la vid (GPGV), en viñedos de la región de Niagara, Ontario, Canadá. Se introdujeron cuarenta vides centinelas que fueron confirmadas libres de GRBV y GPGV tanto por secuenciación de alto rendimiento (HTS) como por reacción en cadena de la polimerasa (PCR) en dos viñedos (uno orgánico y uno convencional) que estaban fuertemente infectados con ambos virus. Cuatro meses después de la introducción, las vides centinelas fueron reubicadas en un fitotrón. Los resultados de HTS de 15 meses después de la introducción revelaron una infección generalizada de GPGV entre las vides centinelas, pero no detectaron ningún GRBV. La tasa de infección por GPGV de las vides centinelas en el viñedo orgánico (13/18) fue mayor que en el viñedo convencional (1/19). Se evaluó la posibilidad de un reservorio viral alternativo mediante la prueba de las plantas más abundantes entre las hileras, plantas perennes en áreas de borde y uva silvestre (especie desconocida). El resultado de HTS mostró que los cultivos de cobertura y las plantas perennes no albergaban virus de la vid, mientras que 4 de 5 uvas silvestres dieron positivo para GPGV pero no para GRBV. Un análisis de identidad de secuencia por pares reveló altas similitudes entre los aislados de GPGV encontrados en las vides establecidas en el viñedo y los nuevos aislados de GPGV en las vides centinelas, implicando un evento de transmisión reciente. Este trabajo proporciona nuevas perspectivas sobre la propagación de virus de la vid en la región de Niagara y también es la primera prueba directa de la propagación de GPGV en condiciones naturales de viñedo en América del Norte.