La enfermedad hepática crónica se caracteriza por la fibrosis hepática progresiva que conduce a la formación de cirrosis, independientemente de la etiología, sin que actualmente exista un tratamiento efectivo. La rigidez hepática (RH) es actualmente el mejor predictor clínico de esta progresión de la fibrosis, sin importar la etiología. Las interacciones entre la RH y los hepatocitos-células no parenquimatosas (CNP) son dos variables que se sabe que son importantes en la regulación de la función hepática durante la fibrosis hepática, pero se conoce poco sobre la interacción de estas señales. Aquí, utilizamos sustratos basados en polidimetilsiloxano (PDMS) con propiedades mecánicas ajustables para estudiar cómo la interacción célula-célula y la rigidez regulan la función de los hepatocitos. Específicamente, los hepatocitos primarios de rata se co-cultivaron con fibroblastos NIH-3T3 en sustratos blandos (2 kPa) y rígidos que recrean la rigidez hepática fisiológica (2 kPa) y la rigidez hepática cirrótica (55 kPa). La síntesis de urea por los hepatocitos primarios dependía de la presencia de fibroblastos y era independiente de la rigidez del sustrato. Sin embargo, la síntesis de albúmina y la actividad de la enzima citocromo P450 aumentaron en los hepatocitos en sustratos blandos y cuando estaban en co-cultivo con un fibroblasto. El análisis de Western blot de marcadores hepáticos, E-cadherina, confirmó que los hepatocitos en sustratos blandos en co-cultivo promovieron un mejor mantenimiento del fenotipo hepático. Estos hallazgos indican el papel de la rigidez en la regulación de las interacciones de los hepatocitos con las CNP necesarias para el mantenimiento de la función de los hepatocitos.