El virus Maedi-visna (MVV) causa una infección persistente en pequeños rumiantes, y su alta heterogeneidad genética afecta el rendimiento de las pruebas diagnósticas cuando se utilizan en diferentes poblaciones. Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue desarrollar un inmunoensayo multiplex basado en perlas diseñado para detectar anticuerpos contra una cepa noruega de MVV. Utilizamos muestras de tejido de 14 ovejas PCR-positivas de un reciente brote de MVV en Noruega para secuenciar la cepa viral y producir antígenos recombinantes basados en secuencias de un animal. El ensayo incluyó antígenos comerciales TM-A y recombinantes noruegos p25, p16-25 y SU5. Se determinaron los valores de corte para cada antígeno utilizando curvas de características operativas del receptor en 40 muestras ELISA-negativas y 67 muestras ELISA-positivas del brote. La repetibilidad intraplaca e interplaca se investigó probando un cuadruplicado de cinco muestras durante tres días, mientras que la sensibilidad analítica (aSe) y la especificidad (aSp) se midieron en comparación con un ELISA comercial. La repetibilidad mostró un coeficiente de variación por debajo del 15% para la mayoría de las muestras positivas. La aSe fue igual o superior para el ensayo multiplex que para el ELISA, y la aSp de cada antígeno fue del 91.7, 93.3, 95.0 y 93.3% para p25, p16-25, SU5 y TM-A, respectivamente. El ensayo muestra resultados prometedores; sin embargo, se necesitan más evaluaciones de las características diagnósticas antes de su implementación en el programa de vigilancia noruego.