Inmunoensayo de flujo lateral de modo dual colorimétrico y fluorescente basado en nanopartículas de oro para la detección de SARS-CoV-2
Autores: Gan, Ying; Zhang, Hefan; Liu, Jing; He, Fuqin; Li, Fengheng; Li, Ao; Xing, Man; Zhou, Dongming; Fung, Shan-Yu; Yang, Hong
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2024
Acceso abierto
Artículo científico
2024
Inmunoensayo de flujo lateral de modo dual colorimétrico y fluorescente basado en nanopartículas de oro para la detección de SARS-CoV-2
Categoría
Ciencias de los Materiales
Subcategoría
Materiales para aplicaciones biomédicas
Palabras clave
Sistema de detección
LFIA
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 13
Citaciones: Sin citaciones
La infección por el coronavirus del síndrome respiratorio agudo severo 2 (SARS-CoV-2) causó la pandemia de COVID-19, impactando la economía global y el sistema médico debido a su rápida propagación y alta infectividad. El control eficiente de la propagación de la enfermedad depende de un sistema de detección rápido, preciso y conveniente para el cribado temprano de la población infectada. Aunque la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa y cuantificación (RT-qPCR) es el método estándar de oro para el análisis de ARN de SARS-CoV-2, tiene procedimientos experimentales complejos y depende de instrumentos costosos y operadores profesionales. En este trabajo, propusimos un inmunoensayo de flujo lateral (LFIA) simple, directo y sin amplificación con detección de ARN de SARS-CoV-2 en modo dual a través de visualización directa y detección por fluorescencia. El ARN viral fue detectado por las sondas de ADN diseñadas para hibridarse específicamente con el marco de lectura abierto 1ab (ORF1ab), la proteína de envoltura (E) y las regiones de nucleocápside (N) del genoma de SARS-CoV-2 para formar híbridos de ADN-ARN. Estos híbridos fueron reconocidos por las nanopartículas de oro de modo dual (DMNPs) para producir dos señales de lectura diferentes. Se exploraron las características de fluorescencia de diferentes tamaños de GNPs. Bajo las condiciones optimizadas, el LFIA presentó un rango de detección lineal de 10-10 TU/mL con un límite de detección (LOD) de 0.76, 1.83 y 2.58 x 10 TU/mL para partículas lentivirales que transportan los motivos ORF1ab, E y N de SARS-CoV-2, respectivamente, en el modo fluorescente, que fue hasta 10 veces más sensible que el modo colorimétrico. Además, el LFIA mostró una excelente especificidad hacia SARS-CoV-2 en comparación con otros virus respiratorios. Podría usarse para detectar SARS-CoV-2 en muestras de saliva. El LFIA desarrollado representa un método prometedor y conveniente de atención en el punto para la detección rápida y en modo dual de SARS-CoV-2, especialmente en períodos con alta infectividad.
Descripción
La infección por el coronavirus del síndrome respiratorio agudo severo 2 (SARS-CoV-2) causó la pandemia de COVID-19, impactando la economía global y el sistema médico debido a su rápida propagación y alta infectividad. El control eficiente de la propagación de la enfermedad depende de un sistema de detección rápido, preciso y conveniente para el cribado temprano de la población infectada. Aunque la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa y cuantificación (RT-qPCR) es el método estándar de oro para el análisis de ARN de SARS-CoV-2, tiene procedimientos experimentales complejos y depende de instrumentos costosos y operadores profesionales. En este trabajo, propusimos un inmunoensayo de flujo lateral (LFIA) simple, directo y sin amplificación con detección de ARN de SARS-CoV-2 en modo dual a través de visualización directa y detección por fluorescencia. El ARN viral fue detectado por las sondas de ADN diseñadas para hibridarse específicamente con el marco de lectura abierto 1ab (ORF1ab), la proteína de envoltura (E) y las regiones de nucleocápside (N) del genoma de SARS-CoV-2 para formar híbridos de ADN-ARN. Estos híbridos fueron reconocidos por las nanopartículas de oro de modo dual (DMNPs) para producir dos señales de lectura diferentes. Se exploraron las características de fluorescencia de diferentes tamaños de GNPs. Bajo las condiciones optimizadas, el LFIA presentó un rango de detección lineal de 10-10 TU/mL con un límite de detección (LOD) de 0.76, 1.83 y 2.58 x 10 TU/mL para partículas lentivirales que transportan los motivos ORF1ab, E y N de SARS-CoV-2, respectivamente, en el modo fluorescente, que fue hasta 10 veces más sensible que el modo colorimétrico. Además, el LFIA mostró una excelente especificidad hacia SARS-CoV-2 en comparación con otros virus respiratorios. Podría usarse para detectar SARS-CoV-2 en muestras de saliva. El LFIA desarrollado representa un método prometedor y conveniente de atención en el punto para la detección rápida y en modo dual de SARS-CoV-2, especialmente en períodos con alta infectividad.