Las células tumorales pueden inducir modificaciones celulares y moleculares importantes en el tejido o huésped donde crecen. La idea de que el huésped y el tumor interactúan entre sí ha llevado al concepto de un microambiente tumoral, compuesto por células inmunitarias, células estromales, vasos sanguíneos y matriz extracelular, que representa un entorno único que participa y, en algunos casos, promueve la progresión del cáncer. El estudio del microambiente inmunitario tumoral, centrándose particularmente en el papel de los linfocitos infiltrantes de tumor (TILs), es altamente relevante en oncología debido a la importancia pronóstica y terapéutica de los TILs en varios tumores y su identificación como objetivos para la intervención terapéutica. El hemangiosarcoma esplénico canino (HSA) es un tumor común; sin embargo, su microambiente inmunitario sigue siendo poco comprendido. Este estudio retrospectivo tuvo como objetivo caracterizar las características histológicas e inmunohistoquímicas de 56 casos de HSA esplénico canino, centrándose particularmente en los linfocitos infiltrantes de tumor (TILs). Evaluamos las correlaciones entre la respuesta linfocitaria, las características macroscópicas e histológicas del tumor y los datos de supervivencia. Nuestro estudio demostró que la distribución de FoxP3 estaba asociada con la muerte relacionada con el tumor y la supervivencia, mientras que el recuento de CD20 estaba asociado con metástasis. Este estudio proporciona una caracterización en profundidad del microambiente inmunitario tumoral en el HSA esplénico canino y describe posibles factores pronósticos.