A pesar de su incapacidad para reproducirse de forma natural, las mulas pueden albergar embriones y ser madres subrogadas. El objetivo de esta investigación fue aumentar nuestro conocimiento sobre la composición cualitativa de la leche de mula y sus variaciones a lo largo de todo el período de lactancia, es decir, desde 6 horas después del parto hasta 180 días en leche (DIM). La leche se obtuvo de una mula que había parido tras recibir un trasplante de embrión de mula. Para cada muestra, se evaluó la composición bruta, mineral y de ácidos grasos. La calidad promedio de la leche de mula fue la siguiente: proteína 1.97 g 100 mL, grasa 0.90 g 100 mL y ceniza 0.39 g 100 mL. Los ácidos grasos saturados representaron, en promedio, 50.00 g 100 g de grasa. Los ácidos grasos monoinsaturados y poliinsaturados constituyeron la mitad del contenido total de ácidos grasos (31.80 g 100 g y 18.2 g 100 g de grasa, respectivamente). El ácido linoleico y el ácido alfa-linolénico fueron los principales ácidos grasos poliinsaturados en la leche. La composición de la leche cambió a lo largo de la lactancia. La materia seca, la proteína, la grasa y la ceniza disminuyeron significativamente desde el inicio de la lactancia (6 h a 14 DIM). Los ácidos grasos poliinsaturados n3 disminuyeron al final de la lactancia. Los cambios en la composición de la leche a lo largo de la lactancia se deben probablemente a adaptaciones a los requerimientos de crecimiento del potro.