La poliploidía, frecuentemente observada en especies cítricas, ayuda a lograr una mejor adaptación a las tensiones ambientales. En este contexto, el trabajo actual tiene como objetivo desarrollar tetraploides estables en cultivares de patrones cítricos, a saber, limón Rugoso, lima Rangpur y Alemow, a través de tratamientos con colchicina. Los explantes derivados de semillas se obtuvieron cultivando semillas estériles en medios basales de MS. Las plántulas con un tamaño de 5-8 mm (hipocótilo) se expusieron al tratamiento con colchicina. Después del tratamiento, las plántulas sobrevivientes se injertaron en miniatura en patrones de seis meses para un mejor crecimiento. Se probaron concentraciones de colchicina del 0.1%, 0.2%, 0.3% y control durante períodos de 16 o 24 h con respecto a la inducción de la poliploidización. El tratamiento con 0.1% de colchicina durante 24 h resultó en altas tasas de mutación para la poliploidización y mostró el porcentaje más alto de inducción de tetraploidía (18.3%) en todos los cultivares de patrones. La alta concentración de colchicina y el tiempo de exposición prolongado disminuyeron la supervivencia de las plántulas observadas. Se utilizaron citometría de flujo y métodos citológicos para la confirmación de la autotetraploidía en las muestras analizadas. Las plántulas sobrevivientes se identificaron en base a variables morfológicas y citológicas, como el área foliar y el tamaño de los estomas, que aumentaron significativamente con el nivel de ploidía. El método propuesto se encontró como una forma efectiva de inducir la poliploidía en los patrones de lima Rangpur, limón Rugoso y Alemow.