Inducción de Células T Reguladoras CD4CD25 a partir de Células Mononucleares Humanas Crecidas In Vitro por Sulfato de Espartina y Harpagósido
Autores: Atwany, Nour Z.; Hashemi, Seyedeh-Khadijeh; Jayakumar, Manju Nidagodu; Nagarkatti, Mitzi; Nagarkatti, Prakash; Hassuneh, Mona Rushdi
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2020
Acceso abierto
Artículo científico
2020
Inducción de Células T Reguladoras CD4CD25 a partir de Células Mononucleares Humanas Crecidas In Vitro por Sulfato de Espartina y Harpagósido
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Células T reguladoras
Sulfato de esparteína
Harpagósido
Foxp3
Tgf-beta
Il-10
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 23
Citaciones: Sin citaciones
Las células T reguladoras (Tregs) son actores clave en la regulación de las respuestas inflamatorias. En este estudio, se investigaron dos moléculas naturales, a saber, sulfato de esparteína (SS) y harpagósido (Harp), por su capacidad para inducir Tregs en células mononucleares de sangre periférica humana (PBMCs). Las PBMCs se aislaron de voluntarios sanos y se cultivaron en presencia o ausencia de ConA, con TGF-beta, SS o Harp. La expresión del ARNm de FoxP3, TGF-beta, IL-10 y GAPDH se evaluó mediante q-PCR. La expresión de marcadores de Treg, incluyendo CD4, CD25, CD127 y FoxP3, se midió mediante citometría de flujo. La secreción de IL-10 y TGF-beta por las células cultivadas se evaluó mediante ELISA. Además, se probó el papel supresor de SS y Harp en PBMCs in vitro a través de la reacción de linfocitos mixtos alogénicos (MLR). Los datos obtenidos muestran que ambos compuestos aumentaron la expresión de ARNm de FoxP3, TGF-beta e IL-10 en PBMCs en reposo, pero en menor medida en células activadas. Además, aumentaron significativamente el porcentaje de Tregs CD4CD25FoxP3CD127 en PBMCs activadas y naïve. Funcionalmente, ambos compuestos causaron una reducción significativa en el índice de estimulación en MLR alogénico. En conjunto, nuestros datos demuestran por primera vez que SS y Harp pueden inducir Tregs humanos in vitro y, por lo tanto, tienen un gran potencial como agentes antiinflamatorios.
Descripción
Las células T reguladoras (Tregs) son actores clave en la regulación de las respuestas inflamatorias. En este estudio, se investigaron dos moléculas naturales, a saber, sulfato de esparteína (SS) y harpagósido (Harp), por su capacidad para inducir Tregs en células mononucleares de sangre periférica humana (PBMCs). Las PBMCs se aislaron de voluntarios sanos y se cultivaron en presencia o ausencia de ConA, con TGF-beta, SS o Harp. La expresión del ARNm de FoxP3, TGF-beta, IL-10 y GAPDH se evaluó mediante q-PCR. La expresión de marcadores de Treg, incluyendo CD4, CD25, CD127 y FoxP3, se midió mediante citometría de flujo. La secreción de IL-10 y TGF-beta por las células cultivadas se evaluó mediante ELISA. Además, se probó el papel supresor de SS y Harp en PBMCs in vitro a través de la reacción de linfocitos mixtos alogénicos (MLR). Los datos obtenidos muestran que ambos compuestos aumentaron la expresión de ARNm de FoxP3, TGF-beta e IL-10 en PBMCs en reposo, pero en menor medida en células activadas. Además, aumentaron significativamente el porcentaje de Tregs CD4CD25FoxP3CD127 en PBMCs activadas y naïve. Funcionalmente, ambos compuestos causaron una reducción significativa en el índice de estimulación en MLR alogénico. En conjunto, nuestros datos demuestran por primera vez que SS y Harp pueden inducir Tregs humanos in vitro y, por lo tanto, tienen un gran potencial como agentes antiinflamatorios.