Este estudio examinó los impactos de la etapa de crecimiento y la duración del ensilado en las características de fermentación, el contenido de nitrito y las comunidades bacterianas durante el ensilado de alfalfa. La alfalfa cosechada se dividió en dos grupos: etapa de crecimiento vegetativo (VG) y etapa de brotación tardía (LB). La alfalfa fresca fue sometida a marchitamiento hasta alcanzar aproximadamente un 65% de contenido de humedad, seguido de una fermentación natural. El experimento siguió un diseño completamente aleatorizado, con muestras recolectadas después del marchitamiento de las materias primas de alfalfa (MR) y en los días 1, 3, 5, 7, 15, 30 y 60 de fermentación. La etapa de crecimiento influyó significativamente en la composición química de la alfalfa, siendo el contenido de proteína cruda significativamente más alto en la alfalfa de la etapa de crecimiento vegetativo en comparación con la de la etapa de brotación tardía (< 0.05). Los carbohidratos solubles, la fibra detergente neutra y el contenido de fibra detergente ácida fueron significativamente más bajos en la etapa de crecimiento vegetativo en comparación con la etapa de brotación tardía (< 0.05). El contenido de nitrito, el contenido de nitrato, la actividad de la nitrito reductasa y la actividad de la nitrato reductasa fueron todos significativamente más altos en la etapa de crecimiento vegetativo en comparación con la etapa de brotación tardía (< 0.05). En términos de parámetros de fermentación, el silo de la etapa de brotación tardía exhibió características superiores en comparación con el de la etapa de crecimiento vegetativo. En comparación con el silo de alfalfa durante la etapa de crecimiento vegetativo, el grupo de la etapa de brotación tardía mostró un mayor contenido de lactato y un nivel de pH más bajo. Notablemente, el ácido butírico solo se detectó en el silo del grupo de la etapa de crecimiento vegetativo. A lo largo del proceso de ensilado, el contenido de nitrito, los niveles de nitrato, la actividad de la nitrito reductasa y la actividad de la nitrato reductasa disminuyeron en ambos grupos de tratamiento. Las bacterias lácticas dominantes diferían entre los dos grupos, siendo predominantes en el silo de alfalfa de la etapa de crecimiento vegetativo, y siendo predominantes en el silo de la etapa de brotación tardía, cambiando a en las etapas posteriores de la fermentación. En el tercer día de fermentación del silo, el grupo de la etapa de crecimiento vegetativo mostró la mayor abundancia de , que posteriormente disminuyó a su nivel más bajo en el día 15. El análisis de correlación reveló que las bacterias lácticas, incluyendo , , , , , y , jugaron un papel clave en la degradación de nitrito y nitrato en el silo de alfalfa. La presencia de nitrito puede estar relacionada con , unclassified_o__Enterobacterales, , , , y .