Los componentes de la matriz extracelular de los biofilms bacterianos incluyen biopolímeros como polisacáridos, ácidos nucleicos y proteínas. Al igual que los polisacáridos, la secreción de adhesinas y otras proteínas de la matriz puede ser regulada por el segundo mensajero cíclico diguanilato (cdG). Hemos realizado proteómica cuantitativa para determinar el contenido de proteínas extracelulares de una cepa que expresa altos niveles intracelulares de cdG. El cdG promovió la exportación de proteínas que probablemente participan en la adhesión y formación de biofilms: la proteína de adhesión rizobial RapA y dos adhesinas probablemente no descritas anteriormente, junto con flagelinas. Inesperadamente, el cdG también promovió la exportación selectiva de proteínas citoplasmáticas. Casi el 50% de estas proteínas citoplasmáticas han sido descritas anteriormente como proteínas de "moonlighting" o candidatas a serlo en otros organismos, a menudo encontradas extracelularmente. Los ensayos de Western blot confirmaron la exportación promovida por cdG de dos de estas proteínas citoplasmáticas, el factor de elongación de la traducción (EF-Tu) y la glicerol-3-fosfato deshidrogenasa (Gap). La inmunotinción por microscopía electrónica de transmisión localizó la proteína Gap en el citoplasma, pero también se asoció con membranas celulares y extracelularmente, lo que indica un proceso activo de exportación que sería potenciado por el cdG. También obtuvimos evidencia de que el cdG aumenta el número de proteoformas extracelulares de Gap, sugiriendo un vínculo entre el cdG, la modificación post-traduccional y la exportación de proteínas citoplasmáticas.