La cuenca mediterránea es abundante en especies comestibles silvestres con numerosos efectos beneficiosos para la salud debido a la presencia de varios fitoquímicos bioactivos. En el presente trabajo, se evaluó el efecto de las tasas de fertilización de nitrógeno (0 ppm (N0), 200 ppm (N1), 400 ppm (N2) y 600 ppm (N3) de N total) y la composición del sustrato de crecimiento (suelo o turba/perlita (2/1)) en la composición química y propiedades bioactivas de las plantas ssp. Los resultados del estudio mostraron que ambos factores probados afectaron el valor nutricional de las hojas comestibles, siendo el tratamiento suelo x N1 el más beneficioso para el contenido de grasa, proteína y carbohidratos y el valor energético. Por otro lado, las plantas cultivadas en turba/perlita que recibieron 200 ppm de N tenían el mayor contenido de alfa-, -, y tocoferoles totales, mientras que el tratamiento de control de las plantas cultivadas en suelo era el más rico en azúcares individuales y totales. Los ácidos oxálico, cítrico y orgánico total fueron más altos en el tratamiento N2 x suelo, mientras que el ácido málico fue más alto en el tratamiento de control del mismo sustrato. Los principales ácidos grasos fueron palmítico, alfa-linolénico y linoleico, con los contenidos más altos observados en los tratamientos N0 x suelo, N3 x suelo y N3 x turba/perlita, respectivamente. Los principales compuestos fenólicos fueron pinocembrina neohesperidosida y pinocembrina acetil neohesperidosida isómero II, con el contenido más alto observado en el tratamiento N1 x suelo. La mayor actividad antihemolítica se observó en el tratamiento N3 x turba/perlita, mientras que los tratamientos más efectivos contra la peroxidación lipídica fueron N0 (tanto en combinaciones de suelo como de turba/perlita) y N1 x turba/perlita. Por último, todos los extractos probados (excepto N1 x suelo) mostraron efectos citotóxicos prometedores contra HeLa (carcinoma cervical), HepG2 (carcinoma hepatocelular), MCF-7 (carcinoma de mama) y NCI-H460 (cáncer de pulmón de células no pequeñas), mientras que todos los extractos probados exhibieron mejores actividades antifúngicas (valores de concentración inhibitoria mínima (MIC) más bajos) que los controles positivos. En general, los resultados actuales sugieren que la aplicación de prácticas rentables como la aplicación de nitrógeno y la selección del sustrato de crecimiento pueden regular la composición química y las propiedades bioactivas de las especies ssp. y aumentar su valor agregado en condiciones de cultivo comercial.