El desarrollo de la gestión del ahorro de agua se basa en comprender la respuesta fisiológica de los cultivos a la sequía del suelo. La regulación coordinada de la hidráulica y la conductancia estomática en las relaciones hídricas de las plantas ha recibido constantemente atención. Sin embargo, la investigación centrada en cultivos de grano, como el trigo de invierno, sigue siendo limitada. En este estudio, se realizaron tres tratamientos de suministro de agua del suelo, incluyendo contenidos de agua del suelo altos (H), moderados (M) y bajos (L), con trigo de invierno en macetas. Se midieron el potencial hídrico de las hojas, la conductancia hidráulica de las hojas y la conductancia estomática, así como parámetros bioquímicos de las hojas y características estomáticas. Los resultados mostraron que, en comparación con H, el potencial hídrico de las hojas antes del amanecer se redujo significativamente en un 48.10% y un 47.91%, el potencial hídrico de las hojas al mediodía se redujo en un 40.71% y un 43.20%, la conductancia hidráulica se redujo en un 64.80% y un 65.61%, y la conductancia estomática se redujo en un 21.20% y un 43.41%, respectivamente, bajo condiciones M y L. Aunque hubo una diferencia significativa entre M y L, no se observaron diferencias significativas entre estos tratamientos. La tasa máxima de carboxilación y la tasa máxima de transferencia de electrones bajo L disminuyeron significativamente en un 23.11% y un 28.10%, la densidad estomática y el índice de área de poro estomático en el lado abaxial aumentaron en un 59.80% y un 52.30%, respectivamente, en comparación con H. El potencial hídrico de las hojas con una pérdida de conducción hidráulica del 50% bajo L no se redujo significativamente. El potencial hídrico se correlacionó positivamente con la conductancia hidráulica y la conductancia estomática, pero se correlacionó negativamente con el ácido abscísico y la densidad estomática. Se observó una relación umbral entre el potencial hídrico y la conductancia estomática, con una reducción rápida y lineal en la conductancia estomática que ocurrió solo cuando el potencial hídrico cayó por debajo de 8.70 mmol m s MPa. Nuestros hallazgos demuestran que las hojas de trigo adaptan estrategias de regulación estomática de anisohídricas a isohídricas en respuesta a la reducción del contenido de agua del suelo. Estos resultados enriquecen la teoría de los compromisos entre la asimilación de carbono y la seguridad hidráulica en los cultivos y también proporcionan una base teórica para las prácticas de gestión del agua basadas en estrategias de regulación estomática bajo diversas condiciones de agua del suelo.