Cuantificación de inhibidores de anhidrasa carbónica y metabolitos en orina y cabello de pacientes y sus familiares
Autores: Lo Faro, Alfredo Fabrizio; Tini, Anastasio; Bambagiotti, Giulia; Pirani, Filippo; Faragalli, Andrea; Carle, Flavia; Pacella, Elena; Ceka, Artan; Moretti, Marco; Gottardi, Massimo; Lassandro, Nicola Vito; Nicolai, Michele; Lupidi, Marco; Mariotti, Cesare; Busardò, Francesco Paolo; Carlier, Jeremy
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2022
Acceso abierto
Artículo científico
2022
Cuantificación de inhibidores de anhidrasa carbónica y metabolitos en orina y cabello de pacientes y sus familiares
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Inhibidores de anhidrasa carbónica
Dopaje
Muestras de orina
Dorzolamida
Brinzolamida
Acetazolamida
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 14
Citaciones: Sin citaciones
Los inhibidores de la anhidrasa carbónica (CAIs) son medicamentos recetados que también se utilizan en el dopaje para diluir muestras de orina y manipular análisis de orina. La dorzolamida, la brinzolamida y la acetazolamida están prohibidas por la Agencia Mundial Antidopaje. Detectar los CAIs y sus metabolitos en muestras biológicas es crucial para documentar el uso indebido en el dopaje. Cuantificamos dorzolamida, brinzolamida, acetazolamida y sus metabolitos en la orina y el cabello de 88 pacientes en tratamiento por hipertensión ocular o glaucoma. Se analizaron muestras de los familiares de los pacientes para evaluar el potencial de exposición accidental. Después de lavar, 25 mg de cabello se incubaron con un tampón ácido a 100 grados C durante 1 hora. Después de enfriar y centrifugar, el sobrenadante se analizó mediante cromatografía líquida de ultra alto rendimiento-espectrometría de masas en tándem (UHPLC-MS/MS). La orina (100 uL) se diluyó y se centrifugó antes del análisis UHPLC-MS/MS. El tiempo de ejecución fue de 8 minutos a través de una columna de fase reversa con un gradiente de fase móvil. El análisis MS/MS se realizó en un modo de monitoreo de múltiples reacciones después de la ionización por electrospray positiva. La concentración urinaria mediana fue de 245 ng/mL (IQR: 116.2-501 ng/mL) para la dorzolamida, 81.1 ng/mL (IQR: 35.9-125.3 ng/mL) para el -deetil-dorzolamida, 0.77 ng/mL (IQR: 0.64 ng/mL-0.84 ng/mL) para el -acetil-dorzolamida, 38.9 ng/mL (IQR: 20.4-79.2 ng/mL) para la brinzolamida y 72.8 ng/mL (IQR: 20.7-437.3 ng/mL) para la acetazolamida. La concentración mediana en cabello fue de 0.48 ng/mg (IQR: 0.1-0.98 ng/mg) para la dorzolamida, 0.07 ng/mg (IQR: 0.06-0.08 ng/mg) para el -deetil-dorzolamida, 0.40 ng/mL (IQR: 0.13-1.95 ng/mL) para la brinzolamida. La acetazolamida se detectó en solo una muestra de cabello. La dorzolamida y la brinzolamida se detectaron en la orina de tres y un familiar, respectivamente. Se necesitan concentraciones de corte de dorzolamida y brinzolamida urinarias para evitar falsos positivos debido a contaminación o exposición pasiva. Informamos las primeras concentraciones de brinzolamida en cabello.
Descripción
Los inhibidores de la anhidrasa carbónica (CAIs) son medicamentos recetados que también se utilizan en el dopaje para diluir muestras de orina y manipular análisis de orina. La dorzolamida, la brinzolamida y la acetazolamida están prohibidas por la Agencia Mundial Antidopaje. Detectar los CAIs y sus metabolitos en muestras biológicas es crucial para documentar el uso indebido en el dopaje. Cuantificamos dorzolamida, brinzolamida, acetazolamida y sus metabolitos en la orina y el cabello de 88 pacientes en tratamiento por hipertensión ocular o glaucoma. Se analizaron muestras de los familiares de los pacientes para evaluar el potencial de exposición accidental. Después de lavar, 25 mg de cabello se incubaron con un tampón ácido a 100 grados C durante 1 hora. Después de enfriar y centrifugar, el sobrenadante se analizó mediante cromatografía líquida de ultra alto rendimiento-espectrometría de masas en tándem (UHPLC-MS/MS). La orina (100 uL) se diluyó y se centrifugó antes del análisis UHPLC-MS/MS. El tiempo de ejecución fue de 8 minutos a través de una columna de fase reversa con un gradiente de fase móvil. El análisis MS/MS se realizó en un modo de monitoreo de múltiples reacciones después de la ionización por electrospray positiva. La concentración urinaria mediana fue de 245 ng/mL (IQR: 116.2-501 ng/mL) para la dorzolamida, 81.1 ng/mL (IQR: 35.9-125.3 ng/mL) para el -deetil-dorzolamida, 0.77 ng/mL (IQR: 0.64 ng/mL-0.84 ng/mL) para el -acetil-dorzolamida, 38.9 ng/mL (IQR: 20.4-79.2 ng/mL) para la brinzolamida y 72.8 ng/mL (IQR: 20.7-437.3 ng/mL) para la acetazolamida. La concentración mediana en cabello fue de 0.48 ng/mg (IQR: 0.1-0.98 ng/mg) para la dorzolamida, 0.07 ng/mg (IQR: 0.06-0.08 ng/mg) para el -deetil-dorzolamida, 0.40 ng/mL (IQR: 0.13-1.95 ng/mL) para la brinzolamida. La acetazolamida se detectó en solo una muestra de cabello. La dorzolamida y la brinzolamida se detectaron en la orina de tres y un familiar, respectivamente. Se necesitan concentraciones de corte de dorzolamida y brinzolamida urinarias para evitar falsos positivos debido a contaminación o exposición pasiva. Informamos las primeras concentraciones de brinzolamida en cabello.