La sintasa de prostaciclina (PTGIS; EC 5.3.99.4) cataliza la isomerización de la prostaglandina H a prostaciclina, un potente vasodilatador e inhibidor de la agregación plaquetaria. En la actualidad, existen datos limitados sobre el acoplamiento funcional y las posibles formas de regular PTGIS debido a la información insuficiente sobre las interacciones proteína-proteína en las que está involucrada esta enzima crucial. El objetivo de este estudio es aislar socios proteicos para PTGIS a partir de lisados de tejido de rata. Utilizando Sepharosa 4B activada por CNBr con PTGIS inmovilizada covalentemente como un sorbente de afinidad, identificamos con confianza 58 proteínas únicas mediante espectrometría de masas (LC-MS/MS). La participación de estas proteínas en la formación de complejos de lisado fue caracterizada mediante el perfilado de lisado SEC. Varios miembros potenciales del subinteractoma de PTGIS han sido validados mediante análisis de resonancia de plasmones de superficie (SPR). SPR reveló que PTGIS interactuó con el citocromo P450 2J2 de longitud completa y con la glutatión S-transferasa (GST). Además, se demostró que PTGIS se une a péptidos sintéticos correspondientes a secuencias de GSTA1, GSTM1, reductasa de aldo-ceto (AKR1A1), glutatredoxina 3 (GLRX3) y proteína de unión a nucleótidos de triada de histidina 2 (HINT2). La sintasa de prostaciclina podría estar potencialmente involucrada en interacciones funcionales con nuevos socios proteicos identificados que participan en el metabolismo del hierro y del hemo, el estrés oxidativo, el metabolismo de xenobióticos y fármacos, y el metabolismo de glutatión y prostaglandinas. Se discute el posible papel biológico de la interacción reconocida en el contexto del funcionamiento de PTGIS.