El cáncer colorrectal (CCR) ocupa el segundo lugar como la causa principal de muertes relacionadas con el cáncer en todo el mundo. La N-glicosilación es una de las modificaciones postraduccionales de proteínas más comunes. Por lo tanto, estudiamos el N-glicoma total del suero (TSNG) de 13 pacientes con cáncer de colon en comparación con controles sanos utilizando MALDI-TOF/MS y LC-MS. La N-glicosilación de muestras tumorales de la misma cohorte se cuantificó adicionalmente utilizando una metodología similar. En total, 23 composiciones de N-glicanos se encontraron reguladas a la baja en el suero de pacientes con cáncer de colon, principalmente formas galactosiladas, mientras que el HexNAc2Hex7 rico en manosa, el glicano bi-antennario fucosilado HexNAc4Hex5Fuc1NeuAc2 y el tetra-antennario HexNAc6Hex7NeuAc3 se encontraron regulados al alza en el suero. El análisis de agrupamiento jerárquico del TSNG identificó correctamente al 85% de los pacientes en comparación con los controles. A pesar de ser heterogénea, la N-glicosilación de las muestras tumorales mostró composiciones oligomanosídicas, bi-antennarias hipogalactosiladas y ramificadas sobre representadas en relación con el tejido colónico normal, tanto en el análisis de MALDI-TOF/MS como en el de LC-MS. Además, las composiciones encontradas reguladas al alza en el tejido tumoral no estaban mayormente correlacionadas con las composiciones en el suero de pacientes con cáncer. El perfil de N-glicanos basado en espectrometría de masas en suero muestra potencial en la discriminación de pacientes de controles sanos. Sin embargo, el perfil de composiciones en suero no mostró paralelismo con los N-glicanos en el microambiente tumoral, lo que sugiere un origen diferente de las composiciones encontradas en el suero de pacientes con cáncer.