La transformación de esteroides por microorganismos se utiliza ampliamente en la biotecnología médica. Un gran grupo de hongos filamentosos es uno de los taxones más prometedores para la búsqueda de nuevas reacciones biocatalíticas con el fin de obtener esteroides de importancia farmacéutica. En este trabajo, examinamos 10 hongos filamentosos destructores de témpera de huevo por su capacidad para biotransformar androst-4-en-3,17-diona (AD) durante el cultivo en un medio nutritivo líquido o en una solución buffer. Estas cepas taxonómicamente no relacionadas, pertenecientes a las clases , y , son representantes dominantes del microbioma de las salas donde se almacenan obras de pintura al temple en la Galería Estatal Tretyakov (STG, Moscú, Rusia). Dado que el aglutinante de las pinturas al temple, la yema de huevo, contiene aproximadamente un 2% de colesterol, estos hongos degradadores parecen ser un grupo prometedor para la búsqueda de actividad de conversión de esteroides. Resultó que todos los hongos destructores estudiados son capaces de transformar AD. Algunas cepas mostraron una eficiencia de transformación cercana a la cepa industrial RNCIM F-981. En total, se caracterizaron 33 esteroides formados durante la transformación de AD, para 19 de ellos se estableció la estructura mediante análisis de cromatografía de gases/espectrometría de masas. En este trabajo, hemos demostrado por primera vez que los hongos destructores de pinturas al temple pueden transformar eficientemente esteroides.