Las áreas de los pastizales del Monte Aso en Kumamoto, Japón, son la ubicación principal para la cría de la cepa Kumamoto de ganado japonés marrón (JBRK). Aunque el limonita de Aso, depositado por ceniza volcánica y magma, ha sido comúnmente alimentado a las JBRK embarazadas en esta área, los mecanismos de sus efectos beneficiosos en las JBRK embarazadas aún no se han elucidado. Aproximadamente 100 días antes del día esperado de parto del ternero, se asignaron siete JBRK (cuatro suplementadas con limonita y tres controles sin limonita) a este estudio, de las cuales se recogió un hisopo bucal en el momento de mayor rumia cada 30 días durante 90 días. El ADN extraído de estos hisopos fue luego analizado utilizando un análisis de secuenciación de amplicones del gen 16S rRNA. Se descubrieron diferencias estadísticamente significativas entre los dos grupos a través del análisis de beta-diversidad, aunque los resultados del análisis de alfa-diversidad fueron inconclusos. La microbiota identificada se clasificó en seis clústeres, y tres de los clústeres principales fueron bacterias del rumen central, principalmente digestión de celulosa en el clúster 1, bacterias orales en el clúster 2 y bacterias no centrales del rumen en el clúster 3. En el grupo de limonita, las bacterias del rumen central disminuyeron mientras que las bacterias no centrales del rumen aumentaron, lo que sugiere que la alimentación con limonita altera la microbiota del rumen, particularmente la activación de la microbiota no central del rumen.