Nuevas tecnologías y materiales podrían ayudar en esta lucha contra las infecciones asociadas a la atención médica. Dado que la mayoría de estas infecciones son causadas por bacterias resistentes a los antibióticos, el desarrollo de materiales con propiedades antibacterianas intrínsecas es un campo de investigación prometedor. Combinamos quitosano (CS), con propiedades antibacterianas, con silsesquioxanos oligoméricos poliédricos (POSS), un polímero biocompatible con propiedades físico-químicas, mecánicas y reológicas, creando un hidrogel utilizando el agente de entrecruzamiento genipina. Se investigaron las propiedades antibacterianas de los hidrogeles CS y CS-POSS contra bacterias Gram-positivas y Gram-negativas nosocomiales tanto en términos de daño a la membrana como de variaciones de carga superficial, y finalmente, se estudió la propiedad anti-biofilm a través de microscopía confocal. Ambos materiales mostraron una buena capacidad antibacteriana contra todas las cepas analizadas, tanto en suspensión, con disminuciones porcentuales entre 36.36 y 73.58 para CS y entre 29.86 y 66.04 para CS-POSS, como en placas con disminuciones porcentuales entre 55.29 y 78.32 y entre 17.00 y 53.99 para CS y CS-POSS, respectivamente. Las cepas tratadas en comparación con la condición base mostraron un daño importante en la membrana, lo que también determinó una variación de las cargas superficiales, y finalmente, para ambos hidrogeles, se destacó una notable propiedad anti-biofilm. Nuestros hallazgos mostraron un posible uso futuro de estos materiales biocompatibles en la fabricación de dispositivos médicos y quirúrgicos con propiedades antibacterianas y anti-biofilm intrínsecas.