Este estudio tiene como objetivo evaluar el impacto de (BS) y (LB) en la calidad de la fermentación, las comunidades microbianas y las vías metabólicas predichas en ensilaje mixto hecho de alfalfa e híbrido . Preparamos ensilaje mixto a partir de alfalfa fresca e híbrido en una proporción de 1:1 e inoculamos con BS, LB, o una combinación de ambos (BSLB) o lo dejamos sin tratar como control. El ensilaje se fermentó durante 30 y 60 días. Los resultados mostraron que la inoculación con BS, LB, o su combinación aumentó el contenido de ácido láctico y proteína bruta mientras reducía el contenido de fibra en comparación con el control. Además, la inoculación de BS y LB aumentó ( < 0.05) el contenido de ácido acético, y la combinación de ambas cepas aumentó ( < 0.05) la proporción de ácido láctico a ácido acético. LB solo y la inoculación combinada también aumentaron la abundancia relativa de durante el período previo al ensilaje. El análisis funcional a través de la Enciclopedia de Genes y Genomas de Kyoto (KEGG) reveló variaciones considerables entre los diferentes tratamientos probióticos. El proceso de ensilaje redujo el metabolismo de nucleótidos pero mejoró el metabolismo de carbohidratos, aminoácidos, energía, cofactores y vitaminas. La secuenciación de alto rendimiento combinada con la predicción funcional de KEGG demostró diferencias significativas en la composición de la comunidad y los cambios funcionales a los 30 y 60 días de fermentación. Estos hallazgos mejoran nuestra comprensión de las comunidades bacterianas y los cambios funcionales en el ensilaje mixto de alfalfa e híbrido , ofreciendo valiosas ideas sobre los mecanismos de fermentación del ensilaje de leguminosas y pastos e informando prácticas para producir ensilaje mixto de alta calidad.