Las condiciones de sequía exhiben varios cambios fisiológicos y morfológicos en los cultivos y, por lo tanto, reducen el crecimiento y el rendimiento de los cultivos. Para mitigar los impactos negativos del estrés por sequía en la producción de soja (L. Merr.), la identificación y selección de genotipos que estén mejor adaptados a la disponibilidad limitada de agua en una condición ambiental específica puede ser una estrategia efectiva. Este estudio tuvo como objetivo evaluar la herencia de los rasgos de cierre estomático temprano en la soja utilizando una población de líneas recombinantes endogámicas (RIL) derivadas de un cruce entre N09-13890 y Ellis. Treinta líneas de soja fueron sometidas a un estrés progresivo por déficit de agua utilizando un experimento de secado. El experimento se llevó a cabo de junio a noviembre de 2022 en el Centro de Investigación y Educación de West Tennessee (WTREC), Universidad de Tennessee en Jackson, TN, bajo condiciones de ambiente controlado. Este estudio identificó diferencias significativas entre las líneas de soja en sus umbrales de cierre estomático temprano. Los umbrales de la fracción de agua del suelo transpirable (FTSW) entre las 30 líneas probadas variaron de 0.18 a 0.80, en los cuales se observó la disminución de la transpiración con el secado del suelo. Casi el 65% de los RIL tenían valores de umbral de FTSW entre 0.41 y 0.80. Estos resultados, que indican herencia, apoyan la expresión del rasgo de cierre estomático temprano en las líneas progenitoras a un alto nivel en el desarrollo de cultivares para condiciones de estrés por déficit de agua. Por lo tanto, identificar las diferencias en los genotipos de uso de agua y su respuesta a las condiciones de estrés por déficit de agua puede proporcionar una base para seleccionar nuevos cultivares que estén mejor adaptados a los sistemas de producción agrícola áridos y semiáridos.