Investigamos cuatro especies de plantas del Cerrado, es decir, (Miers) A.C.Sm, Lam., Gomes y Mart. ex Hayne, contra la toxicidad del acetaminofén utilizando un ensayo in vitro con células HepG2. La actividad contra la toxicidad del acetaminofén se evaluó utilizando diferentes protocolos, es decir, pretratamiento, cotratamiento y postratamiento de las células con acetaminofén y los extractos de plantas. La viabilidad celular de HepG2 después del tratamiento con acetaminofén fue del 39.61 +/- 5.59% de células viables. En el protocolo de pretratamiento, los extractos pudieron realizar protección con una viabilidad que varió del 50.02 +/- 15.24% al 78.75 +/- 5.61%, acercándose al control positivo silimarina con 75.83 +/- 5.52%. En el protocolo de postratamiento, todos los extractos y la silimarina no lograron revertir el daño por acetaminofén. En el protocolo de cotratamiento, los extractos mostraron protección que varió del 50.92 +/- 11.14% al 68.50 +/- 9.75%, y la silimarina mostró 77.87 +/- 4.26%, demostrando que los extractos acuosos de las especies tampoco aumentan el efecto tóxico del acetaminofén. Esta protección observada en la viabilidad celular fue acompañada por una disminución en ROS. La hepatoprotección de los extractos puede estar relacionada con compuestos antioxidantes, como la rutina y la mangiferina, identificados mediante HPLC-DAD y UPLC-MS/MS. Se demostró que los extractos protegen las células HepG2 contra la toxicidad futura del APAP y pueden ser candidatos para suplementos que podrían usarse para prevenir el daño hepático. En el tratamiento concomitante utilizando los extractos con APAP, se demostró que los extractos no presentan un efecto de toxicidad sinérgico, sin ocurrencia de potenciación de la toxicidad. Los extractos mostraron efectos citoprotectores considerables y características antioxidantes importantes.