Los niveles de expresión de varios genes involucrados en la espermatogénesis humana están influenciados por microARNs (miARNs), específicamente microARN-23a/b-3p. Si bien ciertos genes son esenciales para la espermatogénesis y la función de las células germinales masculinas, la regulación de su expresión sigue siendo poco clara. Este estudio tuvo como objetivo investigar si el microARN-23a/b-3p dirige genes involucrados en la espermatogénesis y el impacto de esta dirección en los niveles de expresión de estos genes en hombres con fertilidad comprometida. Se utilizaron predicciones in silico y ensayos de dual-luciferasa para determinar las posibles conexiones entre la sobreexpresión de microARN-23a/b-3p y la reducción de los niveles de expresión de 16 genes objetivo. Se realizó una PCR cuantitativa por transcripción inversa (RT-qPCR) en 41 hombres oligoasthenozoospérmicos que recibían tratamiento de infertilidad y 41 individuos normozoospérmicos emparejados por edad para verificar el menor nivel de expresión de los genes objetivo. Al emplear ensayos de dual-luciferasa, se encontró que el microARN-23a-3p dirigía directamente a ocho genes, mientras que el microARN-23b-3p dirigía directamente a tres genes. La alteración intencionada del sitio de unión del microARN-23a/b dentro de las regiones no traducidas 3 (3UTRs) de los ocho genes resultó en la pérdida de la respuesta al microARN-23a/b-3p. Esto confirmó que son objetivos directos del microARN-23a-3p, mientras que son objetivos directos del microARN-23b-3p. Las muestras de esperma de hombres oligoasthenozoospérmicos tenían niveles de expresión de genes objetivo más bajos que los hombres normozoospérmicos emparejados por edad. El análisis de correlación indicó una correlación positiva entre los parámetros básicos del semen y los niveles de expresión más bajos de los genes objetivo. El estudio sugiere que el microARN-23a/b-3p juega un papel significativo en la espermatogénesis al controlar la expresión de genes objetivo vinculados a hombres con fertilidad comprometida y tiene un impacto en los parámetros básicos del semen.