Guisantes en Rouge: La suplementación con tirosina mejora la visibilidad del reportero RUBY en
Autores: Simonova, Veronika; Potsenkovskaia, Elina; Kozlov, Nikolai; Vanina, Alexandra; Efremova, Elena; Smirnov, Kirill; Artemiuk, Anastasia; Kiseleva, Anna; Brynchikova, Anna; Konstantinov, Zakhar; Tvorogova, Varvara
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2025
Acceso abierto
Artículo científico
2025
Guisantes en Rouge: La suplementación con tirosina mejora la visibilidad del reportero RUBY en
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Modificación del genoma
Legumbres
Guisantes
Sistema reportero
RUBY
Protocolos de transformación
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 8
Citaciones: Sin citaciones
La modificación del genoma de las leguminosas, en particular de los guisantes, conlleva desafíos significativos. Establecer un sistema de reportero confiable para identificar tejidos que expresan ADN extranjero puede ayudar a optimizar y desarrollar protocolos de transformación para estas especies. El sistema RUBY, basado en la síntesis de betalaina roja a partir de tirosina, ofrece una solución conveniente para monitorear la eficiencia de la introducción de transgenes. Para evaluar la efectividad de la aplicación de RUBY en el cultivo de tejidos de guisante, combinamos la transformación agrobacteriana con un sistema de cultivo in vitro, induciendo el desarrollo de callos. Los explantes transformados demostraron pigmentación RUBY, pero esta desapareció durante el cultivo. Hipotetizamos que este problema es causado por el agotamiento de tirosina. Para verificar esta sugerencia, probamos si la suplementación de tirosina podría mantener el color RUBY. En las etapas posteriores, la pigmentación aún no pudo ser preservada. Sin embargo, nuestras condiciones modificadas aumentaron el porcentaje de explantes de ápice de brote coloreados durante las primeras etapas de cultivo. Por lo tanto, es probable que algunos explantes transformados con el cassette RUBY no sinteticen una cantidad suficiente de betalaina debido al déficit de tirosina endógena. En este caso, agregar tirosina exógena mejoraría la producción de betalaina y mejoraría la detectabilidad de los tejidos que contienen el cassette RUBY. Estos datos pueden ser utilizados para la optimización de las condiciones de aplicación de RUBY para guisantes y otras especies.
Descripción
La modificación del genoma de las leguminosas, en particular de los guisantes, conlleva desafíos significativos. Establecer un sistema de reportero confiable para identificar tejidos que expresan ADN extranjero puede ayudar a optimizar y desarrollar protocolos de transformación para estas especies. El sistema RUBY, basado en la síntesis de betalaina roja a partir de tirosina, ofrece una solución conveniente para monitorear la eficiencia de la introducción de transgenes. Para evaluar la efectividad de la aplicación de RUBY en el cultivo de tejidos de guisante, combinamos la transformación agrobacteriana con un sistema de cultivo in vitro, induciendo el desarrollo de callos. Los explantes transformados demostraron pigmentación RUBY, pero esta desapareció durante el cultivo. Hipotetizamos que este problema es causado por el agotamiento de tirosina. Para verificar esta sugerencia, probamos si la suplementación de tirosina podría mantener el color RUBY. En las etapas posteriores, la pigmentación aún no pudo ser preservada. Sin embargo, nuestras condiciones modificadas aumentaron el porcentaje de explantes de ápice de brote coloreados durante las primeras etapas de cultivo. Por lo tanto, es probable que algunos explantes transformados con el cassette RUBY no sinteticen una cantidad suficiente de betalaina debido al déficit de tirosina endógena. En este caso, agregar tirosina exógena mejoraría la producción de betalaina y mejoraría la detectabilidad de los tejidos que contienen el cassette RUBY. Estos datos pueden ser utilizados para la optimización de las condiciones de aplicación de RUBY para guisantes y otras especies.