Las emisiones de los motores de gasolina modernos representan un riesgo ambiental y para la salud. En este estudio, nuestro objetivo fue comparar la toxicidad de mezclas de compuestos orgánicos extraídos de materia particulada (extractos de PM) producidos por gasolina pura (E0) y una mezcla que contiene un 15% de etanol (E15), que se ofrece como una alternativa a los combustibles fósiles no renovables. Las células humanas de pulmón BEAS-2B fueron expuestas a extractos de PM, y se determinaron biomarcadores de genotoxicidad, como el daño en el ADN evaluado por el ensayo de cometas, la formación de micronúcleos, los niveles de histona H2AX fosforilada, la expresión de genes relevantes para la respuesta al daño en el ADN y la exposición a hidrocarburos aromáticos policíclicos (PAHs). Los resultados mostraron que ambos extractos de PM aumentaron significativamente el nivel de lesiones oxidativas en el ADN. El extracto E0 exhibió un efecto más pronunciado, posiblemente debido al mayor contenido de PAHs nitrados. Otros puntos finales no se vieron sustancialmente afectados por ninguno de los extractos de PM. El análisis de la expresión génica reveló una inducción leve pero coordinada de genes relacionados con la respuesta al daño en el ADN, y una fuerte inducción de genes inducibles por PAH, lo que indica la activación del receptor de hidrocarburos aromáticos (AhR). Nuestros datos sugieren que la adición de etanol a la gasolina disminuyó el daño oxidativo en el ADN, pero no se observó efecto en otros biomarcadores de genotoxicidad. El AhR activado puede desempeñar un papel importante en la toxicidad de las emisiones de PM de gasolina.